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肾癌是泌尿系统常见恶性肿瘤之一，深入探讨其发生机制和影响其生物形为的因素具有重要意义。细胞凋亡与肿瘤的发生具有非常密切的关系，成为当前各国学者的研究热点，目前细胞凋亡的分子机制仍不清楚。近年研究发现，抑癌基因p53在引起细胞凋亡过程中，常伴随p21WAF／CIP1基因的表达，提示p21WAF／CIP1基因可能在细胞凋亡过程中起重要作用。因此研究p21WAF／CIP1基因与细胞凋亡之间的关系对阐明细胞凋亡的分子机制具有重大意义。 本实验运用分子生物学技术研究p21WAF／CIP1基因与肾癌细胞凋亡之间的关系，旨在进一步揭示肾癌细胞凋亡的分子机制。 主要研究内容及结果如下： 一、用免疫组织化学方法检测GRC-1细胞p21WAF／CIP1基因表达情况，结果发现GRC-1细胞中P21蛋白阴性表达。 二、转染p21WAF／CIP1基因对GRC-1细胞凋亡的影响 采用脂质介导法将带有p21WAF／CIP1基因cDNA片段的逆转录病毒表达载体PCEP-p21WAF／CIP1转染到GRC-1细胞中。潮霉素筛选，扩增培养。经原位杂交，打点杂交，免疫组化证实转染成功并获表达。电镜检测瞬时转染后细胞凋亡情况，经形态学观察，流式细胞仪，DNA电泳检测稳定转染后细胞凋亡情况。结果转染p21WAF／CIP148小时后未经任何处理的细胞有脱壁现象，透射电镜观察细胞改变符合早期细胞凋亡特征。取转染后第5代细胞，光镜及电镜下均可见明显的凋亡细胞，作流式细胞仪DNA分析可见在G1期前出现—亚二倍体峰（凋亡峰），其中凋亡细胞占细胞总数的15.3％，DNA电泳呈“梯型”。对照细胞无此现象。表明p21WAF／CIP1的瞬时转染和稳定转染均可介导