芦丁、丹参素体外抗氧化作用的研究

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在人体中会因为一些外源因素或内源的代谢过程使得氧分子变成一些很活泼的氧自由基。当由于某种原因使体内的自由基的产生和清除达不到动态平衡时,它们就会引起各种疾病,比如:心血管疾病,老年痴呆,肿瘤,糖尿病等等。大量实验研究表明,采取有效的预防手段,特别是合理服用抗氧化剂或者自由基清除剂,均可有效控制这些疾病的发生,发挥良好的预防作用。上个世纪中,人工合成的抗氧化剂2-丁基羟基甲苯(BHT)和丁基羟基茴香醚(BHA)在食品工业中广泛使用。但是随着人们对抗氧化剂研究的深入,各种实验数据表明,人工合成抗氧化剂具有致病、致癌作用。而与此同时,天然抗氧化剂以其来源广、抗氧化活性大、安全性高等特点而倍受人们的青睐。因此,筛选高效,安全的天然抗氧化剂成为近年人们研究的热点问题。芦丁广泛来源于各种蔬菜和水果,并且已经普遍用于中国传统医学,主要是针对其具有抗炎,扩张血管,抗癌,抗菌,抗病毒和抗原生生物等活性。丹参也是一种中国的传统中药,广泛用于治疗肝脏及心脏系统的疾病。丹参素是丹参中最主要的水溶性成份。丹参素具有保护心肌,扩张血管,抑制动脉硬化和血栓,改善微循环,调节组织的修复和再生功能,另外还有防腐,抗炎等作用。但目前对芦丁和丹参素清除自由基和抗线粒体损伤的性能尚未见报道。本文综述了芦丁,丹参素概况及其研究进展,研究了它们的抗氧化能力、清除多种自由基的能力及对诱导损伤的鼠肝线粒体的保护作用。通过以上研究,为芦丁,丹参素这两种植物活性成分的开发和利用提供参考和理论依据。在本研究中,我们通过一系列的体外分析体系,包括DPPH·/O2-·/H2O2自由基清除体系,还原力分析体系,Fe2+诱导的脂质过氧化反应和Mo(Ⅵ)-Mo(Ⅴ)自氧化体系,研究芦丁和丹参素的体外抗氧化活性。总的抗氧化力是基于样品将Mo(Ⅵ)还原成Mo(Ⅴ),并随后形成蓝色复合物而测定的。实验结果表明芦丁和丹参素都具有强的抗氧化力。芦丁具有很强的清除自由基能力,而且都具有一定的浓度依赖性。在清除DPPH·、O2-·和H2O2时,芦丁的IC50分别为26.6μg/mL,0.27 mg/mL和0.44 mg/mL。另外芦丁对脂质过氧化也有很强的抑制率,其IC50达到0.37 mg/mL。在所有检测的指标中,丹参素的效果均要好于芦丁,丹参素清除DPPH·、O2-·和H2O2和抑制脂质过氧化的IC50分别为7.0μg/mL,0.098 mg/mL,0.33 mg/mL和0.092 mg/mL。本实验还检测了芦丁和丹参素对诱导损伤的肝线粒体的保护作用。主要的检测指标有:对线粒体产生O2-·的清除能力,抑制线粒体膜的脂质过氧化能力,抑制线粒体肿胀的能力,抑制线粒体蛋白质氧化的能力和对线粒体ATP酶的保护作用。我们发现芦丁和丹参素对线粒体所产生O2-·的清除能力具有浓度依赖性,IC50分别为0.086 mg/mL和0.014 mg/mL。另外,结果显示,芦丁和丹参素可以有效地抑制由Fe2+/Vc引起的蛋白质羰基形成。特别是,芦丁在0.25mg/mL时对蛋白质氧化的抑制率为58.8±0.86%,而丹参素在0.01 mg/mL时,对蛋白质氧化的抑制率可以达到77.3±0.77%。此外,芦丁和丹参素在所测浓度范围内均对线粒体ATP酶有保护作用,且呈浓度依赖性。以上结果说明,芦丁和丹参素可以有效抑制线粒体肿胀和蛋白质氧化,以便使线粒体维持其内外渗透压的平衡。同时它们还通过清除超氧阴离子,维持ATP酶的活性来保护线粒体。因此,可以看出,芦丁和丹参素对肝线粒体有良好的保护作用。研究表明,芦丁和丹参素具有显著的体外抗氧化活性,能有效保护肝线粒体,说明芦丁和丹参素可用于抗氧化药品或功能性食品的开发。芦丁和丹参素的许多药理作用可能与其抗氧化活性有关,需要进一步的研究工作确定其药理作用和抗氧化活性的关系,为芦丁和丹参素在药品或功能性食品开发领域更广泛的应用提供依据。
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