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目的:在表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6、E7、ras基因转化的TC-1小鼠宫颈癌治疗模型中,以表达细胞因子白介素-2(IL-2)的重组非复制型痘苗病毒RNTV1175IL2H6Lac Z和熟地黄多糖(RGP)分别作为佐剂与表达HPV16特异性靶抗原E6和E7的重组复制型痘苗病毒RVVJHPV16E7E6对小鼠进行联合免疫,来探索IL-2和熟地黄多糖作为佐剂分别与宫颈癌疫苗联用时的抗宫颈癌作用,为宫颈癌的预防与治疗提供新的途径。方法:(1)构建和鉴定可表达IL-2的RNTV1175IL2H6Lac Z,并对其体外表达IL-2生物活性进行检测;(2)腹腔注射RNTV1175IL2H6Lac Z与RVVJHPV16E7E6混合物对小鼠进行联合免疫,检测其体内特异性细胞免疫反应及血清中IL-2的水平,同时通过构建TC-1小鼠宫颈癌治疗模型来观察该联合免疫的抗肿瘤功效;(3)以灌胃RGP与肌肉注射RVVJHPV16E7E6方式对小鼠进行联合免疫,检测其体内特异性细胞免疫反应、体液免疫反应及血清中CD4+、CD8+水平,同样通过TC-1小鼠宫颈癌治疗模型来观察该联合免疫的抗肿瘤功效。结果:(1)PCR结果证实RNTV1175IL2H6Lac Z被成功构建。该病毒在CEF细胞中能维持IL-2基因稳定遗传至12代。Western Blot结果表明该病毒表达的IL-2蛋白分子与标准品IL-2一致,且MTT法测得其体外表达的IL-2生物活性单位值可达8.79IU/ml;(2)以RNTV1175IL2H6Lac Z作为佐剂的RVVJHPV16E7E6联合免疫具有增强小鼠产生E7特异性细胞免疫反应的趋势,可使血清中IL-2水平升高,并通过推迟成瘤时间和延缓肿瘤生长速度使小鼠的成瘤率降低30%;(3)以RGP作为佐剂的RVVJHPV16E7E6联合免疫未能增强小鼠产生E7特异性细胞免疫反应和提高体液免疫水平,也不影响小鼠体内CD4+数目、CD8+数目以及CD4+/CD8+的比值,但对小鼠的肿瘤保护率达90%。结论:(1)RNTV1175IL2H6Lac Z作为佐剂,既能促进机体体内IL-2的分泌,又能增强宫颈癌疫苗RVVJHPV16E7E6的抑瘤作用,在宫颈癌生物治疗中具有较好的应用前景;(2)RGP作为植源性生物佐剂虽然未能提高特异性免疫反应水平,但在宫颈癌治疗小鼠动物模型中有增强宫颈癌疫苗RVVJHPV16E7E6抑制肿瘤生长的作用,为以后开展其作用机制研究打下了基础。