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目的：研究K-ras、BRAF基因在结直肠癌中突变特征及其临床意义。方法：采用Real-time PCR法检测412例结直肠癌组织K-ras、BRAF基因常见密码子突变，免疫组织化学染色EliVisionTM plus二步法检测结直肠癌中Ki-67、P53的表达，并分析其突变与Ki-67、P53等临床病理学的关系。结果：412例结直肠癌K-ras基因突变率为37.9%（156/412），单个位点突变率占35.4%（146/412），两个位点的突变率占2.2%（9/412），三个位点突变率占0.2%（1/412）。直肠癌的K-ras基因突变率45.2%（103/228）高于结肠癌28.8%（53/184）（P=0.001）。K-ras突变常见于12和13密码子，其中12位密码子占32.0%；13位密码子占6.1%。突变方式以G>A为主，密码子12突变表现为G12D（15.0%）、G12V（9.5%）、G12C（3.9%）、 G12S（2.9%）、G12A（2.4%）和G12R（0.7%），密码子13突变为G13D（6.1%）。K-ras突变与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤大体类型、组织学分型以及淋巴结转移等临床病理参数无关。（I+II）期结直肠癌K-ras基因突变率30.4%（62/204）低于（III+IV）期(45.2%，94/208)，差异具有统计学意义（P=0.002），基因位点突变分析发现G12V位点突变率在TNM分期（I+II）期的突变率（5.9%，12/204）低于（III+IV）期（13%，27/208），差异具有统计学意义（P=0.014）。结直肠癌中BRAF基因突变率2.4%（10/412），结肠癌中的BRAF基因的突变率（4.9%）高于直肠癌（0.4%），差异具有统计学意义（P=0.001）。结直肠癌K-ras基因突变与BRAF基因突变呈负相关（P=0.016，r=－0.124）。BRAF基因突变与术前血清CA199密切相关，其突变率随着血清CA199水平的升高，BRAF基因突变率显著升高（P=0.04）。根据K-ras、BRAF基因在结直肠癌中的不同状态将结直肠癌分为四种类型：I型K-ras野生型—BRAF野生型占59.5%（245/412）；II型K-ras野生型—BRAF突变型占2.4%(10/412)；III型K-ras突变型—BRAF野生型占38.1(157/412)；IV型K-ras突变型—BRAF突变型占0%(0/412)。I型中结肠癌占49.6%(122/246)低于直肠癌50.4%（124/246），差异无统计学意义；II型中结肠癌占90%（9/10）高于直肠癌10%（1/10），差异有统计学意义（P＜0.05）；III型中结肠癌占34.0%（53/156）低于直肠癌66%（103/156），差异有统计学意义（P＜0.05）；本研究未发现有IV型的病例。K-ras、BRAF基因突变相关的结肠癌以II型为主，直肠癌以III型为主，差异具有统计学意义（2检验，P=0.001）。K-ras、BRAF不同基因状态与P53、Ki67表达及性别、年龄、大体类型、组织学分型、肿瘤大小、术前血CEA、CA199等临床病理学无关（P＞0.05）。结论：在结直肠癌中，K-ras基因突变以单个位点突变为主，其中又以GGT>GAT（G12D）最为常见。K-ras基因G12V位点突变可能与肿瘤进展相关。直肠癌K-ras突变率高于结肠癌，而结肠癌中BRAF突变率高于直肠癌。K-ras、BRAF基因突变在结肠癌和直肠癌中的作用机制可能不同。根据K-ras、BRAF不同基因的分型有望为结直肠癌靶向治疗的靶点选择提供理论依据和新靶点的研究提供线索。