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橄榄(Canarium album Raeusch)又名黄榄、白榄,属于橄榄科(Burseraccae)橄榄属(Canarium L.),是我国著名的亚热带特产水果,具有很高的经济和药用价值。经过长期的自然选择和人工选育,我国的橄榄形成了众多的栽培品种,种质资源十分丰富。广东是我国橄榄的主要栽培区,前人对广东橄榄种质资源做了一系列研究,但多集中在品种资源的调查、植物学特征观测和果实生理生化分析等。由于不同地区间相互引种,致使橄榄品种间亲缘关系复杂,增加了橄榄资源调查、收集、保存以及谱系关系鉴定的难度,因此有必要从DNA分子水平上对橄榄种质的遗传多样性和亲缘关系进行研究。
本研究以广东省鲜食橄榄品种为材料,采用AFLP技术,在建立较稳定的橄榄AFLP分析体系的基础上,筛选出6对扩增谱带清晰、多态性好的引物组合,对63个广东鲜食橄榄品种进行了遗传多样性及亲缘关系分析,主要研究结果如下。
1、通过对橄榄AFLP反应体系各因素进行系统研究,建立了适合橄榄的AFLP分析的酶切连接体系、预扩增体系和选择性扩增体系。
2、从64对引物组合中筛选出6对谱带清晰、多态性高地引物组合:E/AAC-M/CAT;E/AAC-M/CTT;E/ACA-M/CAA;E/AGG-M/CAA;E/ACC-M/CAA;E/ACT-M/CAT。对63个橄榄品种进行扩增分析,共扩增出417条电泳谱带,且全部为多态性带,多态性比率达100%,揭示了橄榄种质资源丰富的遗传多样性。
3、使用NTSYSpc2.10a软件,利用UPGMA供试橄榄品种进行聚类,对其遗传多样性进行分析,建立了广东鲜食橄榄品种资源AFLP聚类图。根据聚类结果将63份供试橄榄资源分成为7大类群。