背景:混合性尿失禁是临床常见疾病,在女性人群中患病率约为7.5～25%。混合性尿失禁临床治疗方案的选择常有一定困难,因为无论是药物治疗还是手术治疗有效率均不高,且有较高的复发率。根据指南推荐,行为疗法、盆底肌训练联合抗膀胱过度活动症的药物治疗通常是女性混合性尿失禁的一线治疗,然而这些疗法难以依从,且药物不良反应较大。虽然女性尿道中段悬吊术是一线治疗失败且以压力性因素为主的患者的治疗选择,但是手术治疗常会导致患者急迫性尿失禁症状加重,最终造成治疗失败。因此,寻找有效率高、可依从性高、复发率低、安全性高的疗法是治疗混合性尿失禁亟待解决的问题。已有研究证实,针刺和中药方剂均能显著改善女性混合性尿失禁的临床症状。然而,二者联合治疗是否具有协同增效的作用尚不明确。本研究试图通过基于析因设计的前瞻性、随机、对照的临床研究探索针刺与中药益气缩泉汤联合治疗脾肾气虚型女性混合性尿失禁的协同增效作用。同时,网络药理学具有多学科融合优势,能够为中药治疗混合性尿失禁的后续基础研究提供多种思路与方向。目的:（1）探索基于健脾益肾法组方的“益气缩泉汤”和针刺疗法对女性混合性尿失禁的治疗作用。（2）探索“益气缩泉汤”和针刺疗法在治疗女性混合性尿失禁方面的协同增效作用。（3）基于网络药理学构建益气缩泉汤的“药物-成分—靶点”网络,探索益气缩泉汤和混合性尿失禁的共同靶标,挖掘治疗过程可能的信号通路,从而预测其作用机制,为后续研究提供思路与方向。方法:本研究采用基于析因设计的前瞻性、随机、对照的临床研究,同时对受试者及数据统计评价者实施盲法。研究中所有受试者均来自于2018年3月至2021年4月间于广安门医院泌尿科门诊就诊的脾肾气虚型女性混合性尿失禁患者。本研究的病例纳入标准为:（1）符合女性MUI的诊断标准,且病程≥1年;（2）符合脾肾气虚证的中医证候诊断标准;（3）年龄在18-65岁之间;（4）尿失禁发作频次≥1次/24小时;（5）自愿参加,并签署知情同意书者。同时符合以上全部条件者方可纳入。病例排除标准为:（1）合并其他解剖异常、神经源性疾病或其他下尿路疾病者,如隐性脊柱裂、膀胱过度活动症、尿道狭窄等;（2）既往有接受抗尿失禁相关手术史的患者;（3）因为其他原因正在使用可能影响膀胱功能药物（如盐酸米多君,M受体阻滞剂,β 3受体激动剂,α受体阻滞剂等）的患者;（4）伴有严重内科疾病、造血系统异常或精神疾病的患者;（5）合并2度以上盆底脏器脱垂者;（6）对中药成分过敏或晕针、惧针的患者;（7）孕妇或哺乳妇女;（8）日常行动受限,或因文化水平或理解障碍而无法进行相关评估者。符合上述任一条件者,均予以排除。合格的受试者被随机分配至针刺联合中药组,安慰针刺联合中药组,针刺联合安慰中药组或安慰针刺联合安慰中药组,接受为期8周的治疗。其中,针刺联合中药组采用中药“益气缩泉汤”（炙黄芪30g,党参10g,当归10g,白术10g,益智仁10g,乌药10g,山药10g,陈皮10g,升麻6g,柴胡6g,覆盆子15g,炒莱菔子10g）颗粒治疗,同时配合针刺治疗,取穴包括双侧足三里、三阴交、中髎、会阳。其中,中髎和会阳穴的针灸针针柄连接电针仪,采用疏密波（4/20hz）,每次治疗30分钟,每周治疗3次。针刺联合安慰中药组在收到针刺治疗的同时,配合中药安慰剂治疗。安慰针刺联合中药组在采用中药“益气缩泉汤”治疗的同时,收到安慰针刺治疗。安慰针刺联合安慰中药组采用安慰中药联合安慰针刺治疗。研究的主要终点指标为通过24小时尿垫试验评价的患者每日漏尿量。次要终点指标包括:通过ICIQ-SF问卷评价的临床症状,72小时排尿日记评价的尿失禁（UI）发作频率,尿失禁的客观缓解率、主观缓解率,I-QOL问卷评价的患者生活质量。此外,研究过程中每组患者出现的不良事件以及不良事件的严重程度均被详细记录,并对不良事件与治疗间关系进行评价。通过TCMSP平台,建立益气缩泉汤药物-成分-靶点网络,利用Genecards、Drugbank、TTD、Disgenet及OMIM数据库,获取和混合性尿失禁/尿失禁相关的疾病靶点,将药物和疾病的共同作用靶点信息导入STRING网站进行蛋白质相互作用分析,并将交集靶点导入富集分析网站DAVID,进行基因本体（GO）富集分析与京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果:本研究最终133例患者完成研究,其中,针刺联合中药组34例;安慰针刺联合中药组33例;针刺联合安慰中药组34例;安慰针刺联合安慰中药组32例。（1）主要终点指标:治疗8周后,针刺联合中药组、针刺联合安慰中药组、安慰针刺联合中药组在患者每日漏尿量方面均较基线呈显著减少（P＜0.01）,但安慰针刺联合安慰中药组与基线相比,并无显著改善（P＞0.05）。对于治疗前后患者漏尿量的变化而言,安慰针刺联合安慰中药组24小时尿垫试验提示患者每日漏尿量降低10.6±27.5克,与之相比,针刺联合中药组（降低68.9±18.8克）、安慰针刺联合中药组（降低60.5±19克）、针刺联合安慰中药组（降低61.2±16.1克）均能更有效的降低患者每日漏尿量（P＜0.01）。此外,基于析因设计的交互作用分析发现,中药益气缩泉汤与针刺疗法存在正向交互作用（P＜0.05）,从而提示中药益气缩泉汤与针刺疗法在改善患者每日漏尿量方面具有协同增效作用。尽管针刺联合中药组能够更有效的降低患者漏尿量,但与安慰针刺联合中药组及针刺联合安慰中药组相比,差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）次要终点指标:临床症状的改善:治疗8周后,四组患者的ICIQ-SF总分均较基线评分呈显著降低（P＜0.01）。就降低幅度而言,安慰针刺联合安慰中药组平均降低2分,虽然对比基线呈现显著降低,但未达到2.52分的最小临床有效性差异,提示该组患者症状改善有限。对比安慰针刺联合安慰中药组,针刺联合中药组,安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组均表现ICIQ-SF总分更显著的降低（P＜0.01）,分别平均下降8.4分,7.1分和7.3分,均远高于MCID,提示此三组患者临床症状具有令人满意的改善。此外,对比安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组,针刺联合中药组呈现出更显著的降低（P＜0.01）。同时,交互作用分析发现,中药益气缩泉汤与针刺疗法在改善患者ICIQ-SF总分方面亦存在正向交互作用（P＜0.0001）。尿失禁发作频率变化:治疗8周后,基于72小时排尿日记,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组均能显著降低尿失禁发作频次（P＜0.01）,尿失禁分别中位降低2（2）,1.7（1）和2（2）次。安慰针刺联合安慰中药组尿失禁中位降低0.5（1.825）,与基线相比并无显著差异（P=0.12）。此外,交互作用分析发现,中药益气缩泉汤与针刺疗法在降低患者尿失禁发作频次方面亦存在正向交互作用（P=0.0045）。尿失禁的客观缓解率:治疗8周后,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组、针刺联合安慰中药组和安慰针刺联合安慰中药组的客观治愈率分别为23.5%,12.1%,14.7%,和0%,总体存在统计学差异（P＜0.001）。组间两两比较结果显示,针刺联合中药组治愈率显著高于安慰针刺联合安慰中药组（P＜0.001）,安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组虽然治愈率高于安慰针刺联合安慰中药组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。此外,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组、针刺联合安慰中药组和安慰针刺联合安慰中药组的客观有效率分别为85.3%,69.7%,67.6%,和15.6%,总体存在统计学差异（P＜0.001）。组间两两比较结果显示,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组总有效率显著高于安慰针刺联合安慰中药组（P＜0.001）。尿失禁的主观缓解率:治疗8周后,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组、针刺联合安慰中药组和安慰针刺联合安慰中药组的主观治愈率分别为20.6%,15.2%,11.8%,和0%,总体存在统计学差异（P＜0.001）。组间两两比较结果显示,针刺联合中药组治愈率显著高于安慰针刺联合安慰中药组（P＜0.001）,安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组虽然治愈率高于安慰针刺联合安慰中药组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。此外,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组、针刺联合安慰中药组和安慰针刺联合安慰中药组的主观有效率分别为67.7%,57.6%,61.8%,和9.4%,总体存在统计学差异（P＜0.001）。组间两两比较结果显示,针刺联合中药组、安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组总有效率显著高于安慰针刺联合安慰中药组（P＜0.001）。生活质量评价和不良事件评价:治疗8周后,四组患者生活质量均有改善。安慰针刺联合安慰中药组I-QOL评分未达到MCID,提示该组患者生活质量的改善有限。对比安慰针刺联合安慰中药组,针刺联合中药组,安慰针刺联合中药组和针刺联合安慰中药组均表现为对I-QOL评分更显著的提高（P＜0.01）,均远高于MCID,提示此三组患者具有令人满意的生活质量的改善。此外,交互作用分析发现,中药益气缩泉汤与针刺疗法在改善患者I-QOL评分方面亦存在正向交互作用（P＜0.0001）。本研究过程中,四组患者均未发生严重不良事件。网络药理学结果:益气缩泉汤和混合尿失禁的交集靶点中筛选出6个核心靶点:TP53,IL6,CASP3,AKT1,TNF,JUN。KEGG富集结果显示益气缩泉汤与混合性尿失禁的交集靶点主要富集在如下通路:癌症中的通路、糖尿病并发症中AGE-RAGE 信号通路、前列腺癌、脂质与动脉粥样硬化、乙型肝炎、膀胱癌、内分泌抵抗、流体切应力与动脉粥样硬化、IL-17信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、癌症中的蛋白聚糖、化学致癌-受体激活、丙型肝炎、胰腺癌、人巨细胞病毒感染、PI3K-Akt信号通路、细胞衰老、结直肠癌、铂耐药等。结论:本研究通过基于析因设计的前瞻性、随机、对照的临床研究,得出以下结论:（1）基于健脾益肾法的中药益气缩泉汤和针刺疗法均能够显著降低女性混合性尿失禁患者的每日漏尿量及尿失禁发作频率,并能够改善患者的临床症状,提高生活质量。（2）基于健脾益肾法的中药益气缩泉汤和针刺疗法治疗女性混合性尿失禁存在协同增效的作用。（3）网络药理学分析表明,益气缩泉汤和混合尿失禁交集的核心靶点为:TP53,IL6,CASP3,AKT1,TNF,JUN。富集分析结果也显示了益气缩泉汤治疗混合性尿失禁的机制可能与炎症、蛋白聚糖、细胞凋亡等通路有关。