【摘 要】
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随着毛细管电泳成为一种主流的分离技术,毛细管涂层在毛细管电泳中已经处在越来越重要的位置,它不但解决了生物大分子的吸附和电渗流控制的问题,还大大提高了其分离效率。但
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随着毛细管电泳成为一种主流的分离技术,毛细管涂层在毛细管电泳中已经处在越来越重要的位置,它不但解决了生物大分子的吸附和电渗流控制的问题,还大大提高了其分离效率。但是涂覆材料及涂覆方法的选择不当,都会不同程度地影响分离效果,更严重的则会造成仪器的污染及损坏。我们针对这些问题,制备了几种简单绿色的毛细管涂层并将其用来分离几种常见蛋白质及实际样品以测试其分离性能。工作展开如下:1.利用多巴胺(DA)的自聚黏附到毛细管内壁,再连接透明质酸形成聚多巴胺/透明质酸(PDA/HA)毛细管涂层,涂层柱对四种蛋白质的分离展现出了较好的分离效果。2.合成了绿色环保、光敏感的重氮树脂(DR)和温度敏感性的聚乙二醇二丙烯酸酯-二硫苏糖醇(PEGDA-DTT),然后利用层层自组装的方法将它们涂覆到毛细管内壁上形成DR/PEDA-DTT-dithiols涂层。该涂层拥有优异的抗蛋白吸附性能,对蛋白质标准样品和鸡蛋清实际样品都有着很好的分离效果,且四层涂层的毛细管柱的分离效果达到最佳。此外,涂层的自清洁性能是其主要的亮点。3.合成了哑铃状接枝共聚物聚环氧乙烷-b-聚苯乙烯-b-聚环氧乙烷(PEO_x-b-PS-b-PEO_x),然后依旧利用DR作为连接体,将其涂覆到毛细管里面形成稳定的共价键涂层,并得到了较好的蛋白质分离性效果,当PEO的接枝链段为6时,其分离效果最好。4.利用DR在毛细管内壁接上引发剂2-溴代异丁酸(BIBA),然后通过原子转移自由基聚合(ATRP),结合3-二甲基(甲基丙烯酰氧乙基)氨基丙烷磺酸盐(DMAPS),直接在其内壁上发生聚合反应形成可控涂层。该涂层能够通过控制反应时间的长短来影响其分离效果并在蛋白质分离中得到了较好的结果。
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