产蛋鸡感染H9N2亚型禽流感病毒后输卵管中卵清蛋白基因表达的变化

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H9N2亚型禽流感病毒(AIV)是低致病性的流感病毒,广泛分布于世界各地,是威胁家禽养殖业的最主要疾病之一。家禽感染后可出现呼吸困难、腹泻、产蛋率下降,蛋品质明显降低,出现软壳蛋、沙壳蛋、蛋清稀薄等现象,给家禽养殖业造成巨大的经济损失。卵清蛋白/卵白蛋白(Ovalbumin/OVA)是鸡输卵管组织的表达产物,是鸡蛋蛋清中的主要蛋白,占蛋清蛋白总重量的65%。鸡OVA基因表达调节鸡蛋中OVA的含量,但有关鸡感染H9N2AIV后鸡输卵管中OVA基因表达规律还未见报道。本试验用H9N2亚型禽流感病毒感染30周龄非免疫健康产蛋鸡,利用凯氏定氮法测定蛋清中蛋白含量,用实时荧光定量PCR检测鸡输卵管膨大部OVA mRNA表达量,目的是研究H9N2AIV感染对鸡蛋品质的影响。1.收集健康对照组产蛋鸡与感染H9N2AIV产蛋鸡每天所产鸡蛋,用凯氏定氮法测定鸡蛋蛋清中蛋白含量。结果发现,与对照组相比,产蛋鸡感染H9N2AIV后七天内,鸡蛋蛋清中蛋白含量有下降的趋势,由10.64%逐渐下降为7.21%。其中,对照组鸡蛋蛋清中蛋白含量为10.64%;产蛋鸡感染H9N2AIV后1天,鸡蛋蛋清中蛋白含量下降为10.43%;感染后2天,鸡蛋蛋清中蛋白含量下降为8.74%;感染后3、4、5、6、7天,鸡蛋蛋清中蛋白含量分别为7.68%、7.70%、7.65%、7.54%、7.21%。这表明H9N2AIV的感染能够引起产蛋鸡蛋清中蛋白含量的降低,出现蛋清稀薄现象。2.实时荧光定量PCR检测产蛋鸡感染H9N2AIV后,输卵管膨大部OVA基因mRNA表达量的变化。结果显示,感染后1天OVA基因mRNA表达量急速上升达对照组的11.78倍,差异显著(P<0.05);感染后3天,OVA基因mRNA表达量下降为对照组的1.18倍;感染后5天,OVA基因mRNA表达量继续下降,仅为对照组的0.01倍;感染后第7天,OVA基因mRNA表达量稍有回升达对照组的0.05倍。蛋鸡感染H9N2AIV后7天内,输卵管膨大部OVA基因mRNA表达量表现出先升高后降低的趋势。研究表明,H9N2亚型禽流感病毒感染产蛋鸡后,蛋清中蛋白含量降低与OVA基因mRNA表达量下调有密切关系。
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