雁鹅原产于安徽省六安地区,现主要分布于安徽省宣城市郎溪县境内,是我国现存的极其珍稀的中型灰鹅品种,已被农业部列为重点保护的地方品种。简单重复序列区间（Inter-simple sequence repeat,ISSR）标记技术最早是Zietkiewicz（1994）提出的一种简单重复序列区间扩增多态性分子标记。它是在SSR（Simple sequence repeat,SSR）的基础上发展起来的,以PCR技术为基础,利用真核生物基因组中广泛存在的SSR来设计引物,无需预先克隆和测序,从而对位于反向排列、间隔不太大的重复序列间的基因组片段进行PCR扩增,扩增的产物经电泳分离获得多态性图谱。该实验技术成本低,特异性强,实验稳定性较高,所需DNA量少,引物设计比SSR简单,不需要知道SSR两端的碱基序列,多态性高。本试验以来自安徽省郎溪县雁鹅原种鹅场的雁鹅为研究材料,应用ISSR技术对雁鹅种群的谱系和遗传多样性进行了探讨。本研究的结果将在分子水平上的提供雁鹅种质特性的有关资料,并且可在一定程度上应用于雁鹅保护的实际工作。所得结果如下:（1）建立了雁鹅ISSR-PCR分子标记技术最佳反应体系。以雁鹅基因组DNA为模板,采用正交设计L₂₅(5⁵)对PCR反应中5个因素(引物、dNYPs浓度、模板DNA、Mg²⁺、TapDNA聚合酶)在5个水平上进行优化实验,在初步实验的基础上通过因素内比较进一步优化各因素在ISSR-PCR反应中的浓度。在25μL的反应体系中,ISSR引物的浓度为0.20μmol/L,dNTPs浓度为0.28mmol/L,模板DNA的用量为40ng,Mg²⁺浓度为1.5 mmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1.0U。扩增程序为94℃变性5min,进行下列35个温度循环:94℃变性1min,退火温度（55℃左右）1min,72℃延伸1min,最后在72℃延伸10min,扩增产物在4℃保存。（2）对各个引物最佳反应体系确立之后,筛选出43个ISSR引物,对94个供试样本进行了扩增,共扩增出216个位点,每条引物扩增出的谱带数在2～7之间,平均为5.0条;各谱带分子量在150bp～2000bp之间。43条引物扩增出的多态性条带共计145条,占总带数的67.13%,多态条带比率在16.67～100%之间,平均为65.60%。（3）根据ISSR图谱计算任意两个个体之间的相似性系数和遗传距离,构建了由94只个体组成的雁鹅种群的遗传距离矩阵,并根据该矩阵,用不加权算术平均组对法（Unweighted pair group mothed with arithmeticmean,UPGMA）对94个个体间的关系进行聚类分析,由此构建了雁鹅种群的谱系图。（4）本研究首次采用ISSR这一核基因DNA标记技术对雁鹅群体遗传变异进行了分析研究。ISSR-PCR扩增产物在雁鹅种群表现出高度的稳定性,并检测到比RAPD等其它分子标记更多的多态位点。在整个实验过程中,也较少出现由于随机因素造成扩增反应不稳定的情况,这充分说明ISSR技术用于分析雁鹅的遗传多样性是可行的,而且具有简便快捷、成本低等特点,可为其在雁鹅种质资源研究与辅助育种中的应用提供直接的试验证据。