Kartogenin通过介导SIRT1/AMPK通路提高间充质干细胞抗氧化功能及成骨诱导的机制研究

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[目的]:  骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种同时涉及到关节软骨及软骨下骨的慢性退变性疾病。近年来,国外研究人员合成小分子化合物Kartogenin能够提高间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)的成软骨分化能力,促进机体内软骨修复。然而,关于 Kartogenin 的其他作用如成骨作用尚未见报道。本文旨在研究分析Kartogenin对骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)抗氧化功能及成骨分化的影响。  [研究方法]:  使用不同浓度梯度(10-8 M到10-6 M)Kartogenin处理成人BM-MSCs,CCK-8法测定细胞增殖能力。通过测定胞质内部活性氧浓度,各类抗氧化酶活力,从而鉴定细胞抗氧化功能变化。通过在细胞成骨分化诱导阶段加入Kartogenin,茜素红染色、蛋白凝胶电泳法、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测分析 Kartogenin 对BM-MSCs成骨分化能力的影响,并分析其潜在可能的机制。  [结果]:  加入Kartogenin后可促进细胞增殖,细胞内ROS水平显著下降,抗氧化酶活力上升,并能够更好的诱导 BM-MSCs 成骨。上述结果中 Kartogenin 的剂量-效应关系呈现正相关。蛋白凝胶电泳法、RT-PCR 检测分析显示沉默信息调节因子 1(Silent information regulator type 1 , SIRT1 )与腺苷酸活化蛋白激酶( Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)等相关基因表达水平上调。加入SIRT1抑制剂沉默SIRT1基因后,Kartogenin的抗氧化及促成骨作用可减弱。  [结论]:  Kartogenin能够通过介导SIRT1/AMPK通路提高BM-MSCs抗氧化功能,并促进细胞成骨分化。
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