蓝舌病作为一种世界动物卫生组织(OIE)必须上报的烈性动物传染病,主要危害牛、羊等家畜,在世界范围内广泛流行。国际组织和各国政府均将蓝舌病列为动物疫病监测和防控的重点,对动物和动物制品国际间贸易具有非常重要的影响。目前,世界各国尚无有效的蓝舌病疫苗和防治措施,只能以免疫监测为主,因此,建立一种快速、灵敏、方便、特异性强的BTV检测方法就变得尤为重要。倏逝波光纤免疫传感器是将倏逝波原理、荧光免疫分析原理及光纤检测结合于一体的检测装置,具有特异性强、灵敏度高、检测速度快、操作简便等优点。因此,在爆炸性物品检测、环境监测、毒品和滥用药品检测、临床疾病监测、食品卫生监测及生物学检测等领域具有广‘泛的应用前景。本研究利用BTV VP7单克隆抗体和BTV VP7蛋白(均为本实验室制备),进行BTV抗体倏逝波光纤免疫传感器检测方法的研究。用BTV VP7蛋白作为光纤包被抗原,VP7单克隆抗体作为检测样品,Cy3标记的羊抗鼠IgG抗体作为检测二抗,进行BTV抗体倏逝波光纤免疫传感器检测方法的建立。本研究借鉴ELISA常用的棋盘法,对光纤包被VP7蛋白浓度和Cy3标记抗体浓度进行优化,结果证实VP7蛋白最佳包被浓度为150μg/ml,Cy3标记抗体的最佳实验浓度为20μg/ml。经过初步优化,得到的VP7单克隆抗体检测下限为10ng/ml。另外,在实验后期对检测步骤进行了优化,将原来的两步法改为一步法,不仅简化了检测步骤,还缩短了检测时间,使此检测方法更加简便、迅速。在倏逝波光纤免疫传感器检测实验中,光纤再生问题一直难以解决。本研究用甘氨酸-HCl缓冲液(pH2.0)、 TEA溶液(pH11.5)和0.5%的SDS (pH1.9)溶液进行光纤的再生,结果显示TEA溶液(pH11.5)的再生效果最好,可以再生至少10个循环；甘氨酸-HCl缓冲液(pH2.0)可以再生6个循环；而0.5%的SDS (pH1.9)溶液只能再生2个循环。因此,在本实验中选用TEA溶液作为光纤再生液。最后,将此检测方法与目前常用的BTV抗体检测方法—ELISA方法进行比较,对此方法进行性能评价。