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金龟子属于鞘翅目金龟总科(Scarabaeoidae)，其幼虫(俗称蛴螬)是一类重要的世界性分布的地下害虫，可危害多种农林植物。20年来全国各地的大量调查表明，蛴螬在地下害虫中危害居首位。本文围绕对鞘翅目暗黑鳃金龟(Holotrichia parallela)铜绿丽金龟(Anomala carpulenta)的幼虫有活性的苏云金芽孢杆菌Cry8Ea1和Cry8Ca2蛋白的表达和纯化进行了研究。HD8E和HBF-1菌株是苏云金芽孢杆菌的菌株，分别含有cry8Ea1和cry8Ca2的基因，编码Cry8Ea1和Cry8Ca2的原毒素(伴孢晶体)。研究表明，两个菌株表达的伴孢晶体均为球形晶体，相对分子质量为130kU。用胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化得到60kU的活性毒素，利用分子筛层析(Superdex200)收集60kU的毒素，然后使用阴离子交换层析进一步纯化得到纯的60kU的毒素。对纯蛋白进行生物活性测定，结果表明Cry8Ea1的原毒素与毒素对暗黑鳃金龟幼虫均具有较高活性，Cry8Ea1原毒素的LC50值为9.47μg／克土，胰凝乳蛋白酶消化后纯化的毒素的LC50值为35.39μg／克土；Cry8Ca2的原毒素和毒素对铜绿丽金龟幼虫也具有很高的活性，Cry8Ca2原毒素的LC50值为0.47μg／克土，胰凝乳蛋白酶消化后纯化的毒素的LC50值为0.08μg／克土，胰蛋白酶消化后纯化的毒素的LC50值为0.003μg／克土。本研究建立了Cry8Ea1与Cry8Ca2活性毒素蛋白的纯化方法，通过该方法可大量获得该毒素的纯品，为进一步研究该蛋白的结构与功能，揭示毒素的杀虫机理奠定了良好的基础。研究中还发现Cry8Ea1和Cry8Ca2蛋白是与DNA相结合的。在本实验中对DNA的作用进行了研究，用透析的方法分别对两种毒素的DNA复合体和去除了DNA的毒素在不同pH条件及不同缓冲液条件下的稳定性进行了比较，结果表明，Cry8Ea1和Cry8Ca2毒素与DNA的复合体的稳定性要比不含DNA的毒素稳定，不易发生沉淀，DNA在维持毒素稳定性中起到重要作用。