铜基MOFs复合材料在化学发光适配体传感器中的应用

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本论文以铜离子为金属节点制备了具有类过氧化物酶活性的铜基MOFs复合材料,以其为催化剂,结合磁性氧化石墨烯、DNA水凝胶以及磁性海藻酸钠水凝胶等分离材料,采用流动注射化学发光分析法,以鲁米诺-NaOH-H2O2为化学发光体系,构建化学发光适配体传感器,实现对疾病相关生物分子(腺苷、溶菌酶、凝血酶)的高灵敏度、高准确度以及高选择性的检测。第一部分工作首先以铜离子为金属节点,以1,3,5-苯三甲酸为有机配体,合成了具有类过氧化物酶活性的铜基MOFs材料(HKUST-1);然后合成了鲁米诺和腺苷适配体修饰的量子点(L-QDs-A-Apt)以及易分离且比表面积大的磁性氧化石墨烯(MGO)。利用电子显微镜、X射线粉末衍射、红外光谱以及紫外光谱等手段对合成的材料进行表征。探究了MGO对L-QDs-A-Apt的吸附性能,得到MGO对L-QDs-A-Apt的吸附量为7 mg/mg,吸附平衡时间为10 min。最后,以MGO为分离材料、L-QDs-A-Apt为信号探针、HKUST-1为催化剂,结合流动注射化学发光分析法,构建用于检测腺苷的“打开”式化学发光适配体传感器。该传感器检测腺苷的线性范围为1.0×10-12–2.2×10-10mol/L,检出限为2.1×10-13 mol/L(3δ)。同时,探究了传感器的选择性和再循环能力,并将构建的传感器用于尿液中腺苷的测定,获得满意结果。第二部分工作首先合成Cu2O纳米立方,以Cu2O为铜源和还原剂,以1,3,5-苯三甲酸为有机配体,制备具有类过氧化物酶活性的铜基MOFs复合材料(Au@HKUST-1);然后利用5’端修饰丙烯酰胺的腺苷适配体(Acry-A-Apt)、氯高铁血红素适配体(H-Apt)以及5’端修饰丙烯酰胺的单链DNA(Acry-ssDNA)合成腺苷响应型DNA水凝胶。采用电子显微镜、X射线粉末衍射、N2吸脱附实验以及红外光谱等手段对合成的材料进行表征。探究了DNA水凝胶对Au@HKUST-1的包覆量,得到DNA水凝胶对Au@HKUST-1的包覆量为0.61 mg/mg。最后,以Au@HKUST-1为催化剂,结合流动注射化学发光分析法,构建用于检测腺苷的新型化学发光适配体传感器。该传感器检测腺苷的线性范围为4.0×10-13–1.5×10-10 mol/L,检出限为1.04×10-13 mol/L(3δ)。同时,探究了传感器的选择性,并将构建的传感器用于尿液中腺苷的检测,获得满意结果。第三部分工作首先以铜离子为金属节点,以1,3,5-苯三甲酸为有机配体,合成了具有类过氧化物酶活性的铜基MOFs复合材料(hemin@HKUST-1),并对其表面进行DNA修饰,制得DNA修饰的铜基MOFs复合材料(hemin@HKUST-1-cDNA);然后以包覆CaCO3的Fe3O4纳米粒子(Fe3O4@CaCO3)为钙源,合成了磁性海藻酸钠水凝胶(M-Alg),对其表面进行溶菌酶适配体(Apt)修饰,得到适配体修饰的磁性海藻酸钠水凝胶(M-Alg-Apt);制备了磁性羧基化碳纳米管(MCNTs)和鲁米诺修饰的溶菌酶适配体(L-Apt)。利用电子显微镜、X射线粉末衍射、N2吸脱附实验以及红外光谱等手段对制备的材料进行表征。L-Apt通过π-π作用吸附于MCNTs上,探究了MCNTs对L-Apt的吸附量,得到吸附量为7.332×10-11 mol/mg。最后,以M-Alg-Apt为分离材料、L-Apt为信号探针、hemin@HKUST-1-cDNA为催化剂,结合流动注射化学发光分析法,构建用于检测溶菌酶的新型化学发光适配体传感器。该传感器检测溶菌酶的线性范围为6.0×10-13–7.1×10-9 mol/L,检出限为2.0×10-13 mol/L(3δ)。同时,探究了传感器的选择性,并将构建的传感器用于唾液中溶菌酶的检测,获得满意结果。第四部分工作首先以铜离子为金属节点,以卟啉钴为有机配体,合成了铜基MOFs纳米片[Cu-TCPP(Co)MOFs],利用Cu-TCPP(Co)MOFs纳米片与金纳米粒子间的静电作用制得具有类过氧化物酶活性的铜基MOFs复合材料[Cu-TCPP(Co)MOFs/Au-ssDNA];然后制备凝血酶适配体1(Apt1)修饰的磁性海藻酸钠水凝胶(Malg-Apt1)和凝血酶适配体2(Apt2)修饰的磁性羧基化碳纳米管(MCNTs-Apt2)实现对复杂样品中凝血酶的分离和富集。利用扫描电子显微镜、X射线粉末衍射、N2吸脱附实验以及红外光谱等手段进行表征。探究了MCNTs-Apt2对Cu-TCPP(Co)MOFs/Au-ssDNA的固定性能,得到MCNTs-Apt2对Cu-TCPP(Co)MOFs/Au-ssDNA的固定量为3 mg/mg,反应时间为15 min;最后,以Malg-Apt1为分离材料、Cu-TCPP(Co)MOFs/Au-ssDNA为催化剂,结合流动注射化学发光分析法,构建用于检测凝血酶的新型化学发光适配体传感器。该传感器检测凝血酶的线性范围为8.9×10-13–5.9×10-10 mol/L,检出限为2.2×10-13 mol/L(3δ)。同时,探究了传感器的选择性,并将构建的传感器用于血清样品中凝血酶的检测,获得满意结果。
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