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皮肤的老化分为两种,即内源性和外源性老化。内源性老化是指随年龄增大,由基因控制的衰老过程；外源性老化主要由紫外线引起,可显著加速皮肤衰老,表现为粗大皱纹、异常色素沉着、细胞外基质降解沉积等。近年来的治疗主要集中于逆转真皮层成纤维细胞的改变,使其重新分泌细胞外基质,促进皮肤新生。本研究通过体外构建光老化模型,并采用脂肪来源干细胞(Adipose-derived stem cells, ADSCs)分泌的生长因子进行治疗,明确脂肪来源干细胞对光老化FB的作用及其机制。目的：利用亚细胞毒剂量中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)反复照射小鼠皮肤成纤维细胞(Murine dermal fibroblasts, MDFs)构建体外光老化模型。方法：体外培养原代MDFs至第2代,采用UVB反复照射,剂量选用60、120、180、240mJ/cm2,间隔时间为12小时,共照射4次；每次照射完毕均更换为含1%血清的培养液培养,检测caspase-3表达和细胞增殖曲线判断最佳照射剂量；采用最佳剂量进行后续实验,在单次照射后立即检测活性氧的生成,在4次照射后12、24、48小时分别检测线粒体膜电位、细胞周期、细胞外基质分泌功能等。结果：120 mJ/cm2为最佳剂量；反复UVB可导致细胞出现一系列衰老表型,经检测符合光老化特征改变,并且可避免单次照射剂量过大引起的细胞死亡,或剂量过小引起的细胞修复。结论：亚细胞毒剂量UVB反复照射可成功建立体外光老化模型,为下一步测试光老化治疗药物或其他手段奠定基础,也可进一步深入研究以阐明光老化机制。目的：探讨富含生长因子的ADSCs裂解液(ADSCs-E)皂否治疗成纤维细胞的一系列衰老表型。方法：体外培养小鼠ADSCs至P2代,将其消化离心后加入适量裂解液,1ml针头反复吹打,与培养液(DMEM+1%FBS)混合制成治疗液,以鼠成纤维细胞裂解液作为对照。预处理成纤维细胞12h后,采用UVB照射4次,继续培养48小时或72小时,观察细胞形态、衰老相关β半乳糖苷酶染色、细胞周期、细胞外基质分泌和降解功能的变化；检测ROS生成和p53等探讨有关机制。结果：DSCs-E可减少UVB引起的细胞肥大和衰老相关β半乳糖苷酶染色,还可促进成纤维细胞分泌细胞基质,减少基质金属蛋白酶的分泌；ADSCs-E对细胞周期有部分逆转作用,可能是通过减少p53的乙酰化,从而减少细胞周期阻滞。结论：ADSCs分泌的细胞因子可用于治疗光老化成纤维细胞的一系列早衰表型,并具有一定的抗氧化作用。具体发挥作用的细胞因子是下一步研究的重点。