论文部分内容阅读
背景和目的 趋化因子受体CXCR4及其配体—基质细胞来源性因子-1(stromal-derived factor-1，SDF-1)与骨髓巨核细胞系造血的关系日益受到重视。近一两年研究发现，它们可以趋化、诱导、成熟与非成熟巨核细胞迁移，增强巨核细胞与骨髓内皮细胞的亲和力与相互作用而促进巨核细胞成熟及最终血小板的释放。而骨髓巨核细胞成熟障碍与血小板释放障碍是特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病过程中的重要环节，其原因不甚明了。因此弄清CXCR4／SDF-1体系在ITP发病时的表达情况，有助于我们更进一步阐明其发病机制，并为预测某些药物治疗效果及判断预后提供直接的理论依据。 对象和方法 ①急性ITP患儿28例，均符合1998年全国小儿血液学会议诊断标准，年龄1.5～13岁。均于治疗前抽取骨髓1.5ml～4ml进行检验，在进行了大剂量丙种球蛋白治疗的部分患儿中，观察了其中的10例 郑州大学2002年硕土毕业论文 特发性血小扳减少性紫貂患儿骨俯巨核细胞CXCR4受体及其配体的研究经大剂量丙种球蛋自①．4g／kg）治疗有效的患儿及 6例丙球治疗无效的患儿（称为难治组人10例丙球治疗有效的患几待血小板升至正常后时，再次抽取骨髓检验。正常对照为12例健康儿童。②骨髓巨核细胞表面CXCR4检测：将1．5刁ml骨髓迅速打人改良PBS中，采用免疫磁珠法分离，ABC it检测 CXCR4受体。③骨髓上清液SgFI的检测：0．sml左右骨髓迅速打入含构椽酸钠试管内，4009离心力离心20分钟取上清液，ELISA试剂盒检测。结果 1．骨髓上清液SDF1水平28例初治ITP患儿骨髓上清夜SDFI浓度为 0．32土 7．05E－02（pg／thl），正常对照为 0．43士 4．46E－02 中g／mlX 10例厂P患儿大剂量丙种球蛋白治疗前为 0．31f 4．64E刀2 （P岁ml），治疗后为 0．42土 4．32E－02巾咖l），难治组为 0．31土 4．13E－02 中旮＜1人初治S＊卜1水平较正常对照组显著降低（尸＜0刀5人大剂量丙球治疗后SD卜1水平较治疗前显著升高（P＜0．05人 治疗后与正常对照组相比差异无显著性（P＞0刀5人 难治组SD卜1水平与丙球治疗前无显著差异u。0．“人 L 巨核细胞表面CXCR4积分 【值比较28例初治患儿CXCR4积分值为2．34f0．40，正常对照组为3．25士0．59，10例nP患儿大剂量丙球治疗前为2．40土0．41，’治疗后为3．18士0．57，难治组为l．82上0．23。初治组CXCR4积分较正常对照显著降低u＜0．05人大剂量丙种球蛋白治疗后较治疗前显著增高u刃．05），治疗后CXCR4积分值与正常对照组相比无显著 2 郑州大学2002年硕士毕业论文 特发性血小板减少性紫匣患儿骨髓巨该细胞CXCR4受体及其配体的研究 差异（P＞0．05人 难治组1＊P患儿C＊＊＊4积分值与丙球敏感组治疗 前相比显著降低（尸＜0刀5人3、巨核细胞表面＊＊＊R4阳性率比较 28例初治叮P患儿CXCR4阳性率为82．68土5．93O，正常对照组为，94．08土 4．67％。丙球治疗前为 84＊0土 4．22％，治疗后为 93．90上＿4．53O，难治组为78．00土5．25O。初治组CXCR4阳性率较正常对照 显著降低（尸＜O．05人大剂量丙球治疗后较治疗前显著升高（P＜0刀5人 治疗后＊＊＊＊4阳性率与正常对照相比无显著差异（P＞0刀5人 难治 组ITP患儿CXCR4阳性率与丙球敏感组治疗前相比显著降低 （尸、0．05人 4、相关性分析 经 Log相关回归分析表明，正常人 ＊＊＊R4与SD卜1水平显著正相关（：相关系数为，0尸35人初治1P 患儿CXCR4与SDFI 之间呈正相关（＊0．459）。 结论 本研究提示：①免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞，是目前国际上 普遍采用的分离技术，该法简单、快速，可获得纯度90％以上的巨 核细胞，值得在实验研究和临床中推广应用；③TP患儿骨髓上清 液SDF水平及巨核细胞表面CX（：R4表达均明显降低，可能是ITPQ 发病时骨髓巨核细胞成熟障碍与血小板释放障碍的原因之一，大剂 量丙种球蛋白治疗后CXCR4及SD卜l水平均升高至正常，提示： ITh患儿骨髓CXCR心SDF－正水平下降与抗血小板抗体作用有关，其 确切作用机制尚待进一步研究；③某些对丙种球蛋白不敏感的难治 性ITP患儿治疗前骨髓巨核细胞表面CXCR4水平明显低于丙球敏 3郑州大学ZopZ年硕士毕业论文 特发性血小板减少性紫摄患儿骨髓巨核细胞CXCR4受体及其配体的研究感组，提示：巨核细胞表面更低水平的CXCR