目的：　　利用SELEX技术筛选与甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)特异性结合的寡核苷酸适配子，为建立MRSA快速诊断的新方法提供实验依据。　　方法：　　甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）为临床分离株，甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA），为国家标准品菌株；体外合成一个含35个核苷酸随机序列总长81nt库容量大约为1015-16的ssDNA文库；优化PCR反应条件；用生物素标记的引物扩增dsDNA，生物素链霉亲和素磁珠分离方法构建ssDNA文库；ssDNA文库先与MSSA结合，反筛除去与其结合的ssDNA，然后与MRSA结合，洗脱与其结合的ssDNA，构建次级ssDNA文库进行下一次筛选。利用PCR技术扩增每轮反筛，正筛后的ssDNA文库，PCR产物进行2％琼脂糖凝胶电泳，观察每轮筛选结果。将最后一轮筛选后得到的ssDNA用测序引物进行PCR扩增，转入JM109大肠杆菌中克隆和测序。应用DNA MAN软件和RNA structer软件对每一个适配子的保守序列和二级结构进行分析。体外合成FITC标记的适配子，利用荧光显微技术及PCR方法鉴定其与MRSA结合的特异性。　　结果：　　在SELEX筛选过程中，随着筛选轮数的增加，ssDNA与MRSA的特异性逐渐增强。经过20轮筛选后，随机文库中的ssDNA几乎不再与MSSA结合，而与MRSA结合的ssDNA得到了富集和进化，说明得到的寡核苷酸适配子可以特异性的与MRSA结合。将最后一轮筛选后得到的ssDNA用测序引物PCR扩增，转入JM109大肠杆菌中克隆和测序，挑选了35个克隆，成功测出30个序列，根据测序结果可发现所有的适配子的一级结构没有共同的同源序列，但可以分为8个家族：家族1含有保守序列ACCCCGACTCGGTTAATACAAAT，家族2含有保守序列 GGTTTTTT，家族3含有保守序列ACCTCG，家族4含有保守序列 AAATGG，家族5含有保守序列 TTGTGT，家族6含有保守序列GGTGGTGT，家族7含有保守序列GATTTACTT，家族8共4个保守序列。二级结构预测分析表明，适配子主要形成茎环结构，这些结构特征可能是适配子与MRSA的结构基础。人工合成7号适配子，进行特异性鉴定，结果发现能特异性结合MRSA，而不与MSSA、MRSCN、MSSCN大肠杆菌结合，说明7号适配子能特异性的与MRSA结合。　　结论：　　本研究建立起以MRSA为靶点的SELEX筛选的平台，获得与MRSA特异性结合的寡核苷酸适配子，为建立快速检测MRSA感染的新方法奠定了基础。