3-吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)是普遍存在的植物激素,在植物生长发育过程中起着重要的作用。IAA最基本的功能不但可以加速和调控植物的生长发育,而且还可以阻碍植物的生长和根、茎、组织建成的作用。ABA的基本作用是促进和抑制植物生长,促进叶子与果实的脱落,影响花期等作用。目前这两种植物激素的检测方法大都存在样品前处理复杂,费时,成本高,重现性和选择性差等缺点。因此,本研究采用了具有实时监测、样品无需预处理、快速灵敏检测等优点的表面等离子体共振(SPR)生物传感器检测IAA和ABA这两种植物激素。为了提高SPR传感器的灵敏度,本文采用两种方法:一种是将金/银合金纳米粒子作为敏化材料引入SPR生物传感器中,另一种是通过加长检测链的方式来提高SPR生物传感器检测的灵敏度。本文包括以下两部分实验内容:(1)两种SPR生物传感器的构建以及对IAA的检测:一种是传统模式SPR生物传感器(传感器1),另一种是引入Au/Ag合金纳米粒子作为增敏材料的SPR生物传感器(传感器2)。首先用不同的物质修饰SPR的芯片。传感器1:先在裸金片上修饰MPA,再修饰蛋白A,蛋白A能与MPA末端的被EDC/NHS活化后的羧基结合使蛋白A修饰到芯片上,用盐酸乙醇胺对芯片进行灭活,IAA抗体的非抗原结合位点能与蛋白A结合使IAA抗体修饰到芯片上,最后进行对IAA的检测。传感器2:先在裸金片上修饰HDT,Au/Ag合金纳米粒子可与金硫键、金银键结合从而使其修饰到芯片上,接下来在传感器2上依次修饰MPA、蛋白A、IAA抗体的方法与传感器1相同。结果两种传感器均能成功的检测IAA,传感器1对IAA浓度为175~350μg/L所对应的波数变化进行线性回归分析,得到线性方程为y=-6.58+0.103 x,R2=0.994,检测限为25μg/L(S/N=3);传感器2对IAA浓度为17.5~250μg/L所对应的波数变化进行线性回归分析,得到线性方程为y=4.27+0.104 x,R2=0.999,检测限为2.2μg/L(S/N=3)。说明传感器2中引入Au/Ag合金纳米粒子确实可以有效的提高检测的灵敏度,此外本实验所构建的SPR生物传感器具有良好的稳定性,特异性及重现性。(2)构建两种SPR生物传感器并成功检测ABA:一种是MPA构建的SPR生物传感器(传感器1),另一种是巯基己酸构建的SPR生物传感器(传感器2)。通过分子自组装技术对SPR生物传感器的芯片进行修饰。传感器1依次修饰HDT、Au/Ag合金纳米粒子、MPA、蛋白A、IAA抗体,最后对ABA进行检测。传感器2与传感器1的不同之处在于将传感器1的MPA换成了巯基己酸,增长了3个碳链,通过加长检测链的方法来提高SPR生物传感器的灵敏度。结果两种SPR生物传感器均能成功的检测ABA,传感器1对ABA浓度为13.1~23.8μg/L所对应的波数变化进行线性回归分析,得线性方程为y=1.29+0.074 x,R2=0.995,检测限为2.3μg/L(S/N=3);传感器2对ABA浓度为3.3~40μg/L所对应的波数变化进行线性回归分析,得线性方程为y=1.12+0.044 x,R2=0.992,检测限为0.56μg/L(S/N=3)。说明传感器2通过加长检测链确实可以有效提高检测的灵敏度,此外本实验所构建的SPR生物传感器具有良好的精密度,稳定性,特异性及重现性。