背景: 如何从根本上解决组织、器官缺损和功能障碍问题,已成为生命科学领域的前沿课题。组织工程学是应用细胞生物学和工程学的基本原理和技术,在体外构建有生物活性的组织用于损伤组织或器官修复的一门交叉学科。寻找满足要求和易于操作的种子细胞是组织工程的关键环节。由于成体干细胞取材相对容易、可在体外培养扩增,以及不存在免疫源性和其固有的对组织的支持作用,具有独特的优势,成为目前种子细胞研究的热点之一。 人们已经分离出骨膜间质祖细胞(PC),并且证实了其成骨和软骨的分化潜能。虽然PC作为组织工程种子细胞具有分离培养技术相对简单、生长状态较为稳定的优势,但仍存在许多有待解决的问题:PC的分离方法、干细胞相关抗原表型、体外定向分化潜能、PC与支架材料的生物相容性等。因此,建立一套完善、科学、成熟的PC培养扩增和体外三维PLGA支架培养模型,以使来源于人的PC作为组织工程的种子细胞更加规范显得十分重要。 目的: (1)从人乳突骨膜分离出间质祖细胞,并在体外扩增、培养,探讨PC的体外增殖能力; (2)检测PC细胞表面的抗原表型,并通过基因芯片技术分析全基因组表达谱特征; (3)验证PC的体外成骨、成软骨和成脂肪定向分化潜能; (4)以PC为种子细胞体外构建三维PLGA支架培养模型,经定向诱导为组织工程骨复合物,探讨该模型组织工程领域推广应用的可行性和有效性; (5)针对临床安全性和个体化的治疗原则,应用基因芯片技术筛选组织工程新生骨复合物形成的相关基因表达变化。