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目的构建日本血吸虫多价膜锚定表达疫苗pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,并研究其免疫原性。方法采用分子克隆技术,构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14)、GST(Sj26)和副肌球蛋白(Sj97)的跨膜共表达质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,转染Hela细胞,通过RT-PCR法检测Sj14、Sj26和Sj97mRNA的表达,间接免疫荧光检测Sj26蛋白的表达。用此疫苗免疫BALB/c小鼠,同时设置生理盐水对照组、空白质粒对照组、pIRES-Sj26组和pIRES-Sj14-Sj26组。用ELISA法检测免疫小鼠血清中的总IgG抗体和小鼠脾细胞分泌IFN-γ的水平。以MTT法检测淋巴细胞的增殖情况。并以FCM分析脾细胞亚群。结果经瞬时转染Hela细胞证明质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26能在体外进行表达。免疫小鼠后ELISA法检测抗体结果表明pIRES-Sj97-Sj14-Sj26能够较各对照组诱导产生高水平的IgG抗体(P<0.01,P<0.05).该组的脾淋巴细胞刺激指数较各对照组也有显著增高(P<0.01),IFN-γ的水平与空白对照组和空载体组有显著差异(P<0.01). CD4+和CD8+T细胞含量百分比有明显增高(P<0.05)。结论pIRES-Sj97-Sj14-Sj26疫苗具有较强的免疫原性,能明显增强BALB/c小鼠的免疫应答反应.为该疫苗抗感染效应的研究奠定了基础,并为日本血吸虫病的防治寻求一种新的多基因组合疫苗的免疫策略。