亚毒性剂量THP联合TRAIL对前列腺癌细胞Du145体外生长影响的研究

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wosee_2008
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目的:通过研究亚细胞毒性剂量的化疗药物吡柔比星(THP)和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌体外生长的影响,探讨两药单独用药和联合用药对人前列腺癌细胞Du145体外生长的影响,为TRAIL抗肿瘤作用的临床应用提供一个新的实验依据,可能为激素难治性前列腺癌的治疗寻求一种新的方案。方法:常规方法培养前列腺癌细胞Du145,给予不同浓度的THP和TRAIL,分为单用THP组、单用TRAIL组、THP+TRAIL联合组、对照组和空白组。各组影响因素作用24小时后,采用MTT比色法测定不同药物浓度作用后,各组细胞生长抑制率,同时选定THP的亚毒性剂量。倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学变化以及生长情况,再采用Annexin V/PI双染色法进行流式细胞术检测前列腺癌细胞Du145的凋亡率。各组药物刺激后,提取Du145细胞胞浆蛋白,采用Western-Blot法进行蛋白印迹显影,检测各组细胞胞浆蛋白内caspase-3的表达。结果:1、THP和TRAIL对人前列腺癌细胞株Du145均有抑制生长作用,THP的抑制作用较强,Du145细胞对其相对敏感。TRAIL虽有抑制作用,但Du145细胞对TRAIL并不敏感。2、亚毒性剂量的THP联合不同药物浓度的TRAIL对Du145细胞有较强的抑制作用,并且呈现出较高的协同作用,其协同因子均大于1,最大协同因子CF=1.38807。3、倒置相差显微镜下观察不同药物浓度刺激下,细胞出现不同程度的死亡。见附图。4、流式细胞术检测发现药物刺激后出现不同程度的凋亡,THP+TRAIL联合组凋亡率最高。同时证明了协同杀伤作用是通过诱导细胞凋亡实现的。5、采用Western-Blot法检测药物刺激后Du145细胞胞浆蛋白内caspase-3蛋白的表达,显影后可见THP+TRAIL联合组刺激后的细胞胞浆蛋白内caspase-3蛋白明显高于单用药物组和对照组。见附图。结论:THP和TRAIL对人前列腺癌细胞株Du145的生长均有抑制作用,但Du145细胞对TRAIL并不敏感。亚细胞毒性的THP联合TRAIL可提高对Du145细胞的抑制作用。亚细胞毒性的THP联合TRAIL作用于Du145细胞,表现出明显的高诱导细胞凋亡作用,增加了Du145细胞凋亡率。亚细胞毒性的THP联合TRAIL作用于Du145细胞所表现的高诱导细胞凋亡作用可能与细胞胞浆蛋白中caspase3蛋白的高表达有关。
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