富硒丹参次生代谢产物含量、指纹图谱和体外抗氧化活性研究

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丹参是我国传统中药材其药理作用与微量元素硒的生物无机化学性质相似。一般在低浓度下,硒对植物体有促进生长,减缓植物衰老,拮抗重金属毒害等作用。硒与丹参活性成分结合在生理作用上可能产生协同增效作用。为了了解硒对丹参次生代谢产物产生的影响,本论文对补硒栽培获得的富硒丹参和普通丹参进行研究,采用高效液相色谱法测定丹参的主要次生代谢产物丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量,并建立丹参脂溶性成分和水溶性成分的指纹图谱分析补硒丹参和普通丹参溶剂浸提成分的含量及种类。采用羟自由基清除法、超氧阴离子清除法和总还原性测定法对两种丹参的体外抗氧化能力进行评价。分析富硒丹参和普通丹参的体外抗氧化活性差异。富硒丹参脂溶性成分研究结果表明2009年田间试验中,补硒组的丹参酮IIA含量比对照组有所提高,高喷组、低施组与对照组,低喷组与高喷组都存在显著性差异(p<0.05);2010年田间试验中,补硒组与对照组的丹参酮IIA含量呈显著性提高(p<0.05)。丹参样品图谱与对照图谱的整体相似度评价发现补硒丹参与普通丹参所含的化学成分种类基本一致,相似度均在0.98以上。对比补硒组和对照组的总峰面积和共有峰总峰面积的平均值,补硒组有明显增加,2009年田间试验中,高喷组和低施组的总峰面积和共有峰总峰面积是对照组的近1.5倍;2010年田间试验中,低剂量组和高剂量组的总峰面积比对照组提高35.86%和24.43%,共有峰总峰面积提高了32.99%和23.54%,实验结果表明除丹参酮IIA的含量有显著增加之外,脂溶性成分中的其他成分也有不同程度的增加。富硒丹参水溶性成分研究结果表明2009年田间试验中,补硒组的丹酚酸B含量比对照组有所提高,四个补硒组与对照组、低施组与高施组都存在显著性差异(p<0.01);2010年补硒实验中高剂量组比对照组提高了4.92%。高剂量组与低剂量组存在显著性差异(p<0.05),在植物耐受的硒浓度范围内丹酚酸B含量与补硒浓度成正比。丹参水溶性成分的指纹图谱相似度均在0.80以上,补硒组和对照组有一定差异,对比补硒组和对照组的总峰面积和共有峰总峰面积的平均值,2009年田间试验中,低喷组、高喷组、低施组和高施组的总峰面积分别是对照组的3.28倍、2.67倍、3.49和3.55倍,共有峰总峰面积是对照组的3.45倍、3.25倍、3.48倍和3.29倍;2010年田间试验中,低剂量组和高剂量组的总峰面积比对照组提高36.24%和99.60%,共有峰总峰面积提高了40.00%和102.3%。富硒对丹参中水溶性成分含量有一定提高作用,一定浓度范围内的外源硒对丹参的生长和有效成分的生成呈有益影响。用羟自由基清除法、超氧阴离子清除法和总还原性测定法测定丹参溶剂浸提成分的体外抗氧化活性,结果表明,补硒组丹参的抗氧化能力均强于对照组,2009年田间试验的四个补硒组对羟自由基的清除率和总还原能力均与对照组有显著性差异(p<0.01),高喷组和高施组对超氧阴离子的清除率与对照品也有显著性差异(p<0.01)。2010年田间试验的补硒组对羟自由基、超氧阴离子的清除率和总还原能力均强于对照组。实验证明,硒对丹参次生代谢产物产生呈有益作用,硒对丹参溶剂浸提成分的体外抗氧化活性有增强作用,硒在一定浓度范围内影响丹参的有效成分和药理作用,硒与丹参活性成分结合在生理作用上可能产生协同增效作用。
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