【摘 要】
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Ii血型系统是第27个红细胞血型系统。它们没有自己的编码基因,i、I抗原分别由线性和分支型多聚N-乙酰半乳糖胺决定,因此其抗原决定簇为糖分子。新生儿脐血红细胞携带i抗原,随
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Ii血型系统是第27个红细胞血型系统。它们没有自己的编码基因,i、I抗原分别由线性和分支型多聚N-乙酰半乳糖胺决定,因此其抗原决定簇为糖分子。新生儿脐血红细胞携带i抗原,随着生长发育,β-1,6-N-乙酰半乳糖胺转移酶活性的出现将2个N-乙酰基乳糖胺(N-AC)分别加到i抗原的线性多聚N-乙酰半乳糖胺结构的3和6位,从而使直链i抗原转变为分支型I抗原。本研究选用脐血红细胞做免疫原,用i(+)和i(-)红细胞进行筛选,得到三株抗i单克隆抗体。通过纯化i单克隆抗体(IgG)作为免疫原,获得了抗i的羊抗鼠二抗。抗i单克隆抗体及其二抗的研制为检测稀有血型ii,提供了必备的检测试剂。通过RT-PCR的方法成功地从胎盘组织中克隆了β-1,6-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因(IgnTc),并构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-IgnTc。重组质粒转染CHO细胞,使IgnTc在CHO细胞中的成功表达。IgnTc活性的出现将CHO细胞表面的i抗原转变为I抗原,获得了I阳性的CHO细胞株,为筛选抗I单克隆抗体及临床鉴定血清中相关I抗体的提供了重要的工具。本研究的实施将进一步确保输血安全,给输血患者带来福音,还将为在中国开展稀有血型的检测、普查工作,建立稀有血型库奠定基础。
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