蛋白酪氨酸激酶（Receptor Tyrosine Kinases，PTKs）参与调控细胞的增殖、迁移、分化、凋亡等一系列细胞生物学事件，同时在肿瘤的发生发展过程中也发挥着非常重要的作用，是肿瘤治疗的关键靶点。胰岛素样生长因子1受体（insulin-like growth factor1 receptor，IGF1R）是蛋白酪氨酸激酶家族的重要成员，与肿瘤的发生发展密切相关。IGF1R在促进细胞增殖、调节细胞恶性转化、保护肿瘤细胞免受凋亡等生物学效应中发挥重要作用，是非常具有潜力的抗肿瘤药物靶点。胰岛素受体（insulin receptor，IR）与IGF1R激酶区具有极高的同源性，结构相似性达84％，尤其是ATP结合区的同源性高达100％，在共表达IR和IGF1R的组织中，两者可形成杂合受体。研究显示，如果使用选择性抑制剂抑制IGF1R激酶活性，IR激酶可代偿IGF1R的活性从而导致其药效降低，也被认为是引起IGF1R选择性抑制剂的临床试验疗效不显著的原因之一。目前在研的IGF1R/IR抑制剂中有多个处于临床不同研究阶段，但尚未有该类抑制剂上市。因此，开发新型IGF1R/IR抑制剂具有重要意义。　　此外，IGF1R参与多种酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors，TKIs)的耐药。最新研究发现，IGF1R活化参与选择性抑制EGFR T790M耐药突变的EGFR三代抑制剂的耐药，提示同时靶向IGF1R和EGFR耐药突变有可能成为克服EGFR三代抑制剂耐药的有效方法。目前尚无同时靶向IGF1R和EGFR耐药突变的双靶向抑制剂报道。　　在此研究背景下，本课题拟分别建立IGF1R/IR抑制剂和IGF1R/EGFRT790M抑制剂筛选平台;通过与化学家进行合作，靶向设计、合成潜在抑制剂，利用所建立的平台进行筛选和活性评价，以期得到新结构、高活性IGF1R/IR抑制剂、及IGF1R/EGFR T790M双靶向抑制剂。本研究分为两个部分。　　第一部分:IGF1R/IR抑制剂筛选平台的建立及抑制剂的筛选与初步评价。　　本部分通过构建表达载体，分别表达、纯化I GF1R、IR胞内区激酶蛋白，并建立了以酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）为基础的IGF1R、IR小分子抑制剂筛选平台。通过对约200种化合物的筛选，得到了若干新结构小分子抑制剂;完成36种萘酰亚胺类衍生物IGF1R抑制剂的活性评价及构效关系分析，并选择代表性化合物15进一步研究，证实其细胞水平IGF1R抑制活性及体外抗肿瘤活性，并确定其为多靶点激酶抑制剂。　　第二部分:IGF1R/EGFR T790M耐药突变双靶点抑制剂筛选平台的建立及抑制剂的筛选与初步评价。　　在含EGFR T790M耐药突变的NCI-H1975细胞中，通过细胞稳定转染技术使其高表达IGF1R全长基因，通过不同方法进行验证该工具细胞株构建成功，可用于双靶向抑制剂的筛选。结合已经建立的基于ELISA方法的IGF1R和EGFR T790M激酶抑制剂筛选平台，对化学家定向设计、合成的41个化合物进行了分子水平和细胞水平两个层面的抑制剂筛选，得到7种高活性、新结构的IGF1R/EGFR T790M耐药突变双靶向小分子抑制剂;选择其中的代表性化合物145221进行了体外抗肿瘤活性评价与研究，证实其分子和细胞水平浓度依赖性有效抑制IGF1R和EGFRT790M活性，值得进一步研究。　　本课题分别成功构建了IGF1R/IR以及IGF1R/EGFR T790M新型双靶向抑制剂筛选平台，为该两类抑制剂的研发提供了重要研究平台;并初步筛选得到高活性、新结构抑制剂，有望成为具有良好开发前景的候选化合物。