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目的:分析应用国产血卟啉衍生物(Hematoporphyrin Derivative,HpD)的光动力学疗法(Photodynamic Therapy,PDT)对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的杀伤效应,为临床PDT治疗脑胶质瘤提供实验依据。方法:第一部分:大鼠C6胶质瘤细胞常规体外培养后,1、MTT法检测PDT后C6胶质瘤细胞的生存率:1)Lumacare-051光动力学治疗仪设定波长628 nm、照光强度20 mW/cm2、照光时间5 min条件下,测定PDT治疗HpD浓度为0 mg/L(对照组)、2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L和40 mg/L各组C6胶质瘤细胞后的生存率;2)C6胶质瘤细胞分别与HpD孵育30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h后,在波长628 nm、照光强度20 mW/cm2、照光时间5 min条件下行PDT治疗,测定各HpD浓度组C6胶质瘤细胞的生存率;3)在波长628 nm、照光时间5 min条件下,分别采用10、20、30 mW/cm2照光强度对各HpD浓度组C6胶质瘤细胞行PDT后测定细胞生存率;2、倒置相差显微镜下观察C6胶质瘤细胞经PDT治疗后不同时间点的细胞形态;3、透射电镜观察C6胶质瘤细胞经PDT治疗后的超微结构。第二部分主要是对PDT治疗引起C6胶质瘤细胞死亡的途径做初步探讨,具体包括:1、DNA琼脂糖凝胶电泳检测不同HpD浓度组C6胶质瘤细胞经PDT治疗后的DNA条带;2、TUNEL法检测不同HpD浓度组C6胶质瘤细胞经PDT治疗后的细胞凋亡率;3、激光共聚焦显微镜下观察C6胶质瘤细胞内游离Ca2+及HpD在PDT后不同时间点的荧光强度。结果:1、不同条件下的PDT治疗对体外培养C6胶质瘤细胞的作用不同:1)当HpD浓度低(2 mg/L)、HpD与细胞孵育时间短( <3 h)时不能对细胞产生抑制或杀伤效应;2)PDT后C6胶质瘤细胞的生存率随着HpD浓度的升高而降低(>20 mg/L后无明显差异),随着HpD与细胞孵育时间的延长而降低(>12 h后无明显差异),随着照光强度的增强而下降(20与30 mW/cm2之间无明显差别)(P<0.05)。2、PDT治疗能够使C6胶质瘤细胞在短时间内出现形态学改变:PDT后1 h部分C6胶质瘤细胞即开始出现细胞回缩,12 h后绝大多数细胞缩小成圆形或椭圆形,部分细胞胞膜起泡、呈碎片样改变;至24 h后可见大量细胞漂浮在培养液中,仅存极少量正