发酵桦褐孔菌的制备工艺及降血糖作用实验研究

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目的:以桦褐孔菌为药性发酵基质,多糖、p-葡聚糖含量为参照标准优化发酵条件,探讨优化后桦褐孔菌发酵产物对2型糖尿病大鼠的降血糖作用。方法:(1)以pH、温度、培养时间单因素对发酵产物中多糖、p-葡聚糖含量的影响,设计出单因素实验,以β-葡聚糖含量为标准,得出最优发酵条件,测定优化后发酵桦褐孔茵中多糖与β-葡聚糖含量。制备发酵后桦褐孔菌多糖待测品,在波长492nm处以蒸馏水为空白测定多糖吸光度。制备发酵后桦褐孔菌p-葡聚糖待测品,在波长555nm处以刚果红溶液为空白测定β-葡聚糖待测品吸光度。(2)健康雄性SD大鼠110只,随机分为2组:正常组以及糖尿病模型组。模型组采用高脂饮食联合链脲佐菌素建立食源性2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠按血糖值随机分6组:模型组(蒸馏水1 ml/kg)、未发酵桦褐孔菌组(1000mg/kg、 2000mg/kg)发酵桦褐孔菌组(1000mg/kg、 2000mg/kg)、阳性对照组(二甲双胍90mg/kg) 。灌胃给药8周后所有大鼠禁食12h心脏采血,分离血清,检测血清中游离脂肪酸含量以及血糖。实验期间每天记录各组实验大鼠摄食量以及每周体重变化。结果:1)桦褐孔菌发酵的最佳条件为:桦褐孔菌培养液pH 5、培养温度50℃、培养7h后桦褐孔菌多糖以及p-葡聚糖含量达到最高峰。2)与未发酵桦褐孔菌相比较,发酵桦褐孔菌多糖、β-葡聚糖含量均显著升高(P<0.01)。3)与正常组相比较,高脂饲料喂养4周后,糖尿病模型组大鼠血清中游离脂肪酸含量升高(P<0.05)。4)与正常组相比较,高脂饲料喂养4周,注射链脲佐菌素(30mg/kg) 72h后,模型组大鼠空腹血糖值显著升高(P<0.01)。5)与模型组相比较,未发酵桦褐孔菌小剂量组治疗第3、4、6、7周体重增加(P<0.05),第2、5、8周体重出现显著差异(P<0.01);未发酵桦褐孔菌大剂量组治疗第1、4、6、7周体重增加(P<0.05),第2、3、5、8周体重出现显著差异(P<0.01);发酵桦褐孔菌小剂量组治疗第3、4周体重增加(P<0.05),第2、5、6、7、8周体重出现显著差异(P<0.01);发酵桦褐孔菌大剂量组治疗1周体重增加(P<0.05),第2-8周体重出现显著差异(P<0.01)。6)与模型组相比较,未发酵桦褐孔菌小剂量组高脂饲料喂养第3周摄食量增加,出现显著差异(P<0.01)。未发酵桦褐孔菌大剂量组高脂饲料喂养第4周摄食量增加(P<0.05),第5周出现出现显著差异(P<0.01)。发酵桦褐孔菌小剂量组高脂饲料喂养第6、7、8周摄食量增加(P<0.05),第4、5周出现出现显著差异(P<0.01)。发酵桦褐孔菌大剂量组高脂饲料喂养第1、2、5周摄食量增加(P<0.05),第4、6、7、8周出现出现显著差异(P<0.01)。与未发酵桦褐孔菌小剂量组相比较,未发酵桦褐孔菌大剂量组第1、7、8周摄食量增加(P<0.05)。发酵桦褐孔菌小剂量第3、4、5、6周摄食量增加,出现显著差异(P<0.01)。与未发酵桦褐孔菌大剂量组相比较:发酵桦褐孔菌大剂量组第4、6、8周摄食量增加(P<0.05),第7周出现显著差异(P<0.01)。7)与模型组相比较,发酵桦褐孔菌大剂量组给药8周后大鼠血糖值显著降低(P<0.01);与未发酵大剂量组相比较,发酵桦褐孔菌大剂量组、阳性对照组降血糖效果明显(P<0.05)。8)与模型组相比较,发酵桦褐孔菌大剂量、小剂量组大鼠血清中游离脂肪酸含量显著降低(P<0.01);与未发酵桦褐孔菌相比较,发酵桦褐孔菌调节2型糖尿病大鼠血清中游离脂肪酸效果明显(P<0.05)。
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