尼古丁对子宫内膜异位症腹腔微环境影响的初步实验研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ivwyniqtd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的: 流行病学研究提示,吸烟能降低子宫内膜异位症的发病。既往研究表明,尼古丁能抑制雌激素合成酶芳香化酶的活性,然而吸烟妇女血雌激素浓度并没有降低到内异症临床药物治疗所达到的近似绝经期的水平,因此这不能完全解释吸烟对内异症发病的影响,可能还存在其他的潜在机制。本研究通过体外实验,观察尼古丁对内异症患者子宫内膜间质细胞增殖的影响,尼古丁和/或雌激素对内异症患者腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞分别培养和共同培养分泌炎性细胞因子TNF-α和IL-8的影响以及对烟碱受体和雌激素受体表达的影响,从而探讨尼古丁对内异症的腹腔炎性微环境的影响,初步探讨吸烟降低内异症发病的可能机制。 材料与方法: 1.经过本院伦理委员会讨论和病人知情同意后,收集子宫内膜异位症患者(主要是卵巢内膜样囊肿患者)的腹腔液分离培养腹腔巨噬细胞;收集子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜组织分离培养子宫内膜间质细胞:两种细胞单独培养与共培养,并用免疫细胞化学鉴定;用MTT法检测不同浓度尼古丁对子宫内膜间质细胞生长的影响; 2.在腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞的培养液中,加入不同处理因素(不同浓度的尼古丁,雌激素,以及尼古丁和雌激素共同作用),再加入脂多糖刺激,收集不同时间点(6h,12h,24h,48h,72h)的细胞培养上清液,用酶联免疫法测定TNF-α和IL-8的浓度; 3.用免疫细胞化学法鉴定,原代培养的腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞的烟碱受体α7亚型(α7 nAChR)和雌激素受体α(ERα)的细胞定位。 原代培养的腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞中,加入尼古丁、雌激素,作用24h后,提取蛋白,用Western Bloaing检测α7 nACR和ERα表达的改变。 结果: 1.尼古丁对子宫内膜间质细胞增殖没有明显影响; 2.尼古丁对腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-8有抑制作用,雌激素存在时,这种抑制作用仍然存在; 3.尼古丁对子宫内膜间质细胞分泌TNF-α有抑制作用,对IL-8分泌没有明显影响; 4.尼古丁对腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞共培养系统分泌TNF-α和IL-8有抑制作用,雌激素存在时,这种抑制作用仍然存在; 5.腹腔巨噬细胞和子宫内膜间质细胞具有α7 nAChR和ERα的表达,分别定位于细胞膜和细胞核; 6.尼古丁随浓度升高能促进子宫内膜间质细胞α7 nAChR和ERα的表达,与雌激素共同作用时,两种受体表达降低; 7.尼古丁能促进巨噬细胞α7 nAChR的表达,而抑制ERα的表达。 结论: 1.吸烟降低内异症发病,可能不是通过尼古丁直接抑制子宫内膜间质细胞的增殖,而是通过尼古丁抑制内异症腹腔微环境中炎性因子的分泌,从而对内异症发生发展产生抑制效应; 2.由于尼古丁激动受体α7 nAChR,导致抑制炎性因子的分泌,因此α7nAChR可能是未来药物治疗内异症的一个干预靶点。
其他文献
本文对新生儿重症监护室早产儿脑损伤及危险因素进行了探讨。本研究将NICU的胎龄≤34周或出生体重≤2000克的早产儿,应用超声诊断仪进行系列床边头颅B超检查。根据Papile分类