猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)是引起断乳猪多系统衰竭综合征等多种疾病的主要病原体,病毒的主要衣壳蛋白Cap在体外可自组装成病毒样颗粒。研究表明Cap蛋白与补体蛋白C1q膜受体gC1qR、动力蛋白轻链DYNLL1等蛋白存在相互作用,影响病毒复制及细胞功能。关于Cap蛋白互作蛋白的研究有助于了解PCV2感染的分子机制。因此对PCV2病毒的Cap蛋白的互作蛋白的研究具有重要意义。根据GenBank中PCV2基因序列,设计cap基因特异性引物,PCR扩增该基因,构建重组Cap蛋白的原核表达质粒pET-28a-Cap,大量诱导表达、纯化重组蛋白,免疫新西兰大白兔,获得Cap蛋白的多克隆抗体。设计一对包含attB重组位点的cap基因特异性引物,PCR扩增获得带有attB1和attB2位点的cap基因片段,利用Gateway技术构建真核稳定表达质粒pDEST-SFB-Cap,转染PK-15猪肾细胞,利用嘌呤霉素筛选,获得携带SFB标签的稳定表达重组Cap蛋白的PK-15细胞株。免疫共沉淀和Western bolt检测到重组Cap蛋白的表达。间接免疫荧光检测发现重组Cap蛋白在部分细胞内呈点状荧光分布,可能形成病毒性颗粒;流式细胞仪检测表明Cap蛋白的表达可诱导PK-15细胞凋亡。本研究成功获得Cap蛋白的多克隆抗体和建立携带SFB标签的Cap蛋白的稳定表达PK-15细胞株,为下一步通过串联亲合纯化/质谱方法鉴定Cap蛋白的互作蛋白研究奠定基础。