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目的：骨髓基质细胞(bone marrow stromal Cells，BMSCs)作为一种成体干细胞，具有一定的自我更新、高度增殖和多向分化的潜能。在适宜的条件下，可以诱导分化为神经样细胞。BMSCs来源方便，取材较容易，体外培养和扩增的技术条件简便，具有向神经样细胞分化的潜能。本课题在建立大鼠BMSCs体外分离、培养、纯化及扩增体系的基础上，研究BMSCs在体外培养中的生物学特性，以及向神经样细胞分化的能力，为下一步人骨髓基质细胞的体外分离培养奠定基础，同时为进一步临床治疗提供理论依据及治疗基础。方法：本实验采用全骨髓贴壁培养法，利用BMSCs贴壁速率快的特点，接种早期更换培养基去掉非贴壁细胞，反复换液纯化。经原代及传代培养扩增BMSCs后，研究其在体外培养中的生长曲线等生物学特性及其超微结构，进行瑞士染色观察细胞形态，免疫细胞化学检测CD44从而对其鉴定。在此基础上，通过碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)两种诱导因子的作用，诱导BMSCs向神经细胞分化，观察细胞形态变化，以免疫细胞化学检测β-微管蛋白Ⅲ(β-TubulinⅢ)和神经胶质纤维酸性蛋白(glial acidic fibrillary pro-tein，GFAP)的表达作为观测指标。结果： 1.全骨髓接种培养，经贴壁法分离纯化得到BMSCs，原代可见许多混杂血细胞，生长缓慢，14天达70-80％传代，至3代时细胞趋于一致，瑞士染色观察细胞形态，免疫细胞化学检测CD44呈(+)．2.本实验采用bFGF、EGF两种诱导因子诱导BMSCs向神经样细胞分化，观察细胞有形态的变化，免疫细胞化学检测β-TubulinⅢ(+)和GFAP(+)。结论：1.在本实验，通过全骨髓贴壁法分离纯化，BMSCs细胞易于获得，成活率较高，增殖稳定，原代呈多形性，至3代形态趋于一致。2.在体外bFGF、EGF两种诱导因子可以诱导BMSCs向神经样细胞分化，分化过程中有细胞形态变化，同时有特异性标志物β-TubulinⅢ和GFAP的表达。3.成年大鼠骨髓中存在具有多分化潜能的BMSCs，易于体外扩增，在一定条件下可向神经样细胞分化，是细胞移植治疗神经系统疾病的较好种子细胞。