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目的通过研究内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase,e NOS)基因G894T、促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)基因T3541G、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosises factor-alpha,TNF-α)基因G308A等多态性位点基因型频率在青海省汉族妊娠高血压疾病(pregnancy-induced hypertension syndrom,PIH)患者和正常孕妇之间分布的差异性,检测两组血浆中EPO、TNF-α含量,比较两组血液中e NOS m RNA相对表达差异性,探讨e NOS基因G894T、EPO基因T3541G、TNF-α基因G308A多态性与妊娠高血压疾病的关联性,为青海地区妊娠高血压疾病的预防提供依据。方法收集青海省各大医院汉族人群中妊娠高血压患者和正常孕妇外周血标本和临床资料,提取基因组DNA,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法分别扩增e NOS SNP/G894T、EPO SNP/T3541G、TNF-αSNP/G308A等多态性位点,采用特异性酶对e NOS基因G894T、EPO基因T3541G、TNF-α基因G308A进行多态性分型。分别对不同基因型的目的片段测序,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national center for biotechnology information,NCBI)数据库中比对,确保扩增产物真实可靠,并对酶切结果加以验证;使用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中EPO、TNF-α含量;使用半定量反转录-聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction,Sq RT-PCR)方法分析血液中e NOS基因m RNA表达情况。结果1.e NOS基因GG、GT、TT基因型频率在PIH组分别为17.4%、82.6%、0%,对照组分别为0%、95.6%、4.4%,两组比较存在差异性(P<0.05)。PIH组G、T等位基因频率分别为58.7%、41.3%,对照组分别为47.8%、52.2%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),PIH组G等位基因频率高于对照组。PIH组比对照组(OR=1.553,95%CI为1.107~2.178),G等位基因为PIH的易感基因(OR=1.229,95%CI为1.048~1.441)。2.EPO基因TT、TG、GG基因型频率在PIH组分别为9.7%、74.2%、6.1%,对照组分别为42.9%、46.4%、10.7%,两组比较有差异(P<0.05)。PIH组野生纯合型(TT)频率明显低于对照组,突变型(TG、GG)基因型频率高于对照组。PIH组等位基因T、G频率分别为46.8.%,53.2%,对照组分别为66.1%、33.9%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),PIH组T等位基因频率低于对照组,G基因频率明显高于对照组,PIH比对照组(OR=0.451,95%CI为0.311~0.655),G等位基因为妊高征的危险因素(OR=1.569,95%CI为1.263~1.949)。3.TNF-α基因GG、GA、AA基因型频率在PIH组中分别为18.18%、72.73%、9.09%,对照组为42.86%、52.38%、4.76%,两组比较有显著差异性(P<0.01)。PIH组突变型(GA+AA)基因型频率(81.82%)明显高于对照组(57.14%)。PIH组G等位基因频率(54.55%)低于对照组(69.05%),A等位基因频率(45.45%)高于对照组(33.95%),(P<0.01)。PIH组比对照组(OR=0.538,95%CI:0.375~0.771),A等位基因为PIH的易感基因(OR=1.469,95%CI:1.170~1.843)4.PIH组血浆中EPO含量为(454.113±35.097)pg/m L,对照组为(396.316±50.262)pg/m L,PIH组明显高于对照组(P<0.01)。5.TNF-α含量在PIH组血浆中为(21.976±17.570)pg/m L,对照组为(27.797±14.730)pg/m L两组比较没有统计学差异(P>0.05)。6.PIH组e NOS m RNA表达相对强度为(1.007±0.155),对照组为(1.243±0.329),PIH组低于对照组(P<0.05)。结论1.e NOS SNP/G894T、EPO SNP/T3541G、TNF-αSNP/G308A多态性与青海省汉族妊娠高血压疾病相关,e NOS SNP/G894T位点G等位基因、EPO SNP/T3541G位点G等位基因、TNF-αSNP/G308A位点A等位基因为妊娠高血压疾病的易感基因。2.EPO基因在妊娠高血压疾病患者血浆中高表达。3.TNF-α含量在PIH患者血浆中没有变化。4.e NOS m RNA在PIH患者血液中低表达。