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番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)属于马铃薯Y病毒科(Potyviridae)马铃薯Y病毒属(Potyvirus)。根据寄主范围的不同,PRSV可分为P和W两个株系,其中W株系(PRSV-W)只侵染葫芦科作物,引起花叶和果实环斑等症状,严重影响作物产量和品质。近年PRSV-W在山东、河南等地区的发生呈上升趋势。本研究制备了PRSV-W抗血清,分析了葫芦科作物品种对PRSV的抗性,测定了弱毒突变体对野生型PRSV的交叉保护效果。主要研究结果如下:1、利用原核表达的衣壳蛋白制备了效价高、特异性强的PRSV抗血清。将PRSV-W衣壳蛋白(CP)基因连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta。经诱导可表达出约37 kD的蛋白,最适IPTG终浓度0.2 mmol/L、诱导时间4 h。经ELISA检测,抗血清效价为1:8192。Western blotting结果表明,该抗血清只与PRSV-W侵染的西葫芦有特异性反应,而与健康西葫芦、西瓜花叶病毒侵染的西葫芦和马铃薯Y病毒侵染的普通烟均无反应。2、通过室内接种试验鉴定了55个葫芦科作物品种对PRSV的抗性。在鉴定的13个黄瓜品种中,唐山秋美、精选唐山秋瓜、耐热王中王和辽研翠玉4个品种的病情指数分别为32.2、34.4、37.8和38.9,属于中抗品种,其余均为感病或高感品种;七叶早南瓜、瑞丽甜蜜本、日本南瓜和一品甜红栗的病情指数介于31.1与39.4之间,属于中抗品种。长丰肉丝瓜和常丰长香丝瓜的病情指数分别为50.5和54.4,属于感病品种。13个甜瓜品种、11个西瓜品种、11个西葫芦品种和2个瓠瓜品种,病情指数都在60以上,属于高感品种;3、测定了三个弱毒突变体对野生型PRSV的交叉保护效果。在保护间隔期为5天时,三个弱毒突变体均没有表现出交叉保护效果。在保护间隔期为10天时,挑战接种后15天,弱毒突变体N137A预先接种的西葫芦植株均无明显症状,保护效率为100%,与只接种野生型植株相比,预先接种N137A的西葫芦植株中病毒粒子的积累量显著降低;弱毒突变体N346A能够延迟发病15天;弱毒突变体V417A没有表现出交叉保护效果。在保护间隔期为15天时,N137A的保护效率为100%;N346A的保护效率为26.7%,V417A仍然无明显的交叉保护效果。