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本研究课题组在先前的工作中已通过双向凝胶电泳和 MALDI-TOF质谱技术发现UVB照射前后人皮肤成纤维细胞中存在33个差异表达的蛋白质点,并鉴定了其中的7种蛋白,Annexin A2、死亡受体反应蛋白(RIP)、脯氨酰4-羟化酶(PHD4)、白介素1受体辅助蛋白(IL-1 RAcP)、PGKl(磷酸甘油酸激酶)、Vimentin(波形蛋白)和Prohibitin(抑制素)。
目的:针对上述7种蛋白质,采用相应的抗体检测这些蛋白质在培养人皮肤成纤维细胞中经紫外线照射后的表达的变化,进一步研究紫外线对其差异表达的影响,以寻找紫外线早期损伤的标志性蛋白。
方法:用100mJ/cm<2>UVB照射培养人皮肤成纤维细胞,48小时后提取细胞总蛋白。采用Western-blot及免疫荧光技术检测目标蛋白的差异表达,测定Western-blot的条带灰度,SPSS软件分析其统计学意义。
结果:UVB照射后成纤维细胞中Vimentin和RIP蛋白表达上调,且具有显著性差异(p<0.05)。而Prohibitin、IL-1 RAcP和PHD4蛋白含量的变化没有显著性差异(p>0.05)。
结论:Vimentin和RIP很有可能是紫外线早期损伤的标志性蛋白。