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支持细胞(sertoli cell)为各级生精细胞提供营养、支持、保护作用，分泌一些对精子发生有重要作用的成分，参与FSH、睾酮对生殖细胞的的调节作用。 Shp2是一种细胞质中的蛋白酪氨酸磷酸酶，弥散性表达于全身各器官，调控多种生长因子的信号，调节细胞增殖和分化、参与免疫反应、调控代谢。研究支持细胞当中的Shp2对精子发生的调控具有理论意义和实用价值。虽然在努男综合症(noonan)中涉及过Shp2与雄性生殖的关系，以及大鼠睾丸支持细胞中Shp2介导肝细胞生长因子(HGF)的Ras-MAPK信号通路，过表达Shp2破坏血睾屏障marker(Zo-1，N-cadherin，β-cantenin，F-actin)的表达分布，且在小鼠整个睾丸或者在生殖细胞内敲除Shp2都能导致雄性不育，但Shp2在睾丸支持细胞内的作用与功能还未完全探讨。 利用两种模型Shp2flox/floxpAMH-cre、Shp2floxp/floxpinhibinα-cre，特异性的在睾丸支持细胞、支持细胞与间质细胞当中去除Shp2。Shp2去除后，2周小鼠睾丸明显减小，发育受阻，成年雄鼠100％不育。HE染色表明，3周开始睾丸出现空泡化，并可见睾丸结构破坏、精子发生受阻;8周附睾中不见成熟精子。虽然直到4周，TUNEL法检测到睾丸切片内凋亡细胞数增加，但支持细胞marker-WT1免疫荧光染色表明，支持细胞数量一直没有减少，到成年后，有部分曲细精管中只剩下支持细胞，没有生殖细胞。 未分化的精原细胞marker-PLZF、精母细胞marker-S TRA8、减数分裂的marker-S CP3免疫荧光染色表明，2周精原干细胞和各级生精细胞的数量明显减少了。然而在1周，精原干细胞数目没有受影响;减数分裂启动marker-STRA8和减数分裂中的marker-SCP3的阳性细胞数却增加了，这表明精原干细胞分化增强了。进一步，精原细胞自我更新的marker-PH3与PLZF双染，及KIT的单染实验表明:Shp2在支持细胞去除后，对精原干细胞的自我更新影响甚微，但在早期引起精原干细胞的过度分化。在探讨分子机制上，Shp2在支持细胞去除后，引起支持细胞旁分泌蛋白SCF，BMP4（调节精原干细胞分化的因子）的表达量升高，而调节精原干细胞增殖的因子GDNF表达量不变;采用基因表达谱芯片分析，许多关于精原干细胞增殖与分化的基因表达产生了变化，如:LIN28a，Epcam，Etv5等。这些结果表明在支持细胞Shp2的去除打破了精原干细胞增殖与分化平衡，引起早期精原干细胞的过度分化。 免疫组化与免疫荧光染色表明，与对照相比，支持细胞敲除组中的血睾屏障marker----紧密连接蛋白Claudin11、间隙连接蛋白Cx43，2周开始分布有明显区别，表达量升高;紧密连接蛋白JAM-A在睾丸切片上连接消失，仅在支持细胞核内有表达，在组织中表达量显著降低。组织免疫荧光染色表明，紧密连接蛋白Zo-1分布没有明显区别，表达量不变，而在4周黏附连接蛋白β-catenin表达量减少。在探讨分子机制上，Shp2在支持细胞去除后，血睾屏障调节蛋白TPA的表达量升高，而它的同类UPA的表达量不变。采用基因表达谱芯片分析，很多有关血睾屏障的基因的表达量发生变化，这些基因包括血睾屏障的某些marker（Claudin1，5，8，10，15下降，Cx43上升，TES下降）及调节蛋白(Icam1，Mmp2，Mmp17下降)。这些结果表明Shp2是血睾屏障的重要调控蛋白。TER实验表明，在敲除Shp2支持细胞内恢复Shp2的表达，能逆转支持细胞间的紧密连接程度;在正常支持细胞内过表达Shp2，紧密连接程度减弱。这个结果表明支持细胞内合适的Shp2活性对血睾屏障的组装是必须的。我们进一步探讨了这个体系的机制，在支持细胞内敲除Shp2能抑制P-ERK的活性，而增加P-AKT的活性，转染过表达Shp2的突变体(Q79P)能恢复P-ERK的活性，又能抑制P-AKT的表达（不论在对照还是在敲除细胞内）。 在信号通路机制探讨方面，在支持细胞内Shp2的缺失能抑制FSH和睾酮刺激的P-ERK的活性，而使卵泡刺激素(FSH)和睾酮(testosterone)刺激的P-AKT的活性进一步的升高;在支持细胞内Shp2的缺失能抑制FSH刺激ABP的升高，而使睾酮刺激的AR进一步的升高。Western blot分析了2周睾丸组织内FSH和睾酮target gene的表达，发现SCSKO组中Pem，ABP，PDGF-A，E-FABP的表达量下降;SCF，AR，DMRT1的表达量上升;AMH，FSHR，GDNF，WT1，Dhh，TRF，β-catenin,N-cadherin的表达量没有改变。 在TM4细胞中，Shp2的特异性抑制剂PHPS1抑制FSH引起P-ERK、P-AKT的上升，说明Shp2可通过支持细胞的FSH的MAPK，AKT信号通路来调节下游基因的表达。Shp2的特异性抑制剂PHPS1能抑制睾酮(T)引起TM4细胞P-ERK的上升，说明Shp2可参与支持细胞的睾酮(T)的MAPK信号通路，来调节下游基因的表达。此外，PHPS1能抑制FSH引起的TM4细胞功能性蛋白AR，Zo-1，AMH的升高。