论文部分内容阅读
本论文选择合成一些Cu(II)配合物并探讨它们的核酸活性及对DNA损伤的机理。选择1,10-Phenanthroline作为插入配体,同时引入不同结构的氨基酸,由此合成三种不同结构的配合物如[Cu-Phen-Thr]ClO4·H2O ,[Cu-Phen-Ser]ClO4·H2O,[Cu-Phen-Tyr]ClO4·H2O。此外在本实验室工作的基础上,选择多酚化合物为还原剂,如绿原酸,芦丁和没食子酸。利用实验室现有条件,通过电化学、紫外吸收光谱、荧光光谱、电泳等技术探究三种配合物对DNA的氧化切割性能。全文共分为四章:(1)综述了金属配合物氧化损伤DNA的研究进展,影响因素及研究方法等,并提出论文设想。(2)本章工作主要采用1,10-phenanthroline为插入配体,同时引入苏氨酸作为辅助配体,合成铜配合物[Cu-Phen-Thr],探究它在以绿原酸为还原剂的条件下对DNA损伤的机理。我们通过琼脂糖凝胶电泳技术,发现DNA在适当的配合物浓度和培养时间条件下,DNA可被有效地损伤切割。在我们设计的损伤体系中,羟基自由基是最重要的活性氧物种,它进攻DNA碱基中最易被氧化的鸟苷位点,我们通过电化学方法检测到了鸟苷氧化的标志性产物,即8-羟基-2′-脱氧鸟苷。(3)本章工作主要以芦丁作为生物还原剂,考察铜邻菲咯啉丝氨酸配合物[Cu-Phen-Ser]对pBR322 DNA、小牛胸腺DNA以及PCR扩增产物的损伤。在适当的浓度和培养时间时,我们用琼脂糖凝胶电泳检测了DNA损伤的效果,实验发现我们所设计的配合物[Cu-Phen-Ser]与芦丁的混合体系对诱导DNA链的断裂有很高的效率。(4)本章工作主要以没食子酸作为生物还原剂,考察铜邻菲咯啉酪氨酸配合物[Cu-Phen-Tyr]对pBR322 DNA损伤。光谱实验说明[Cu-Phen-Tyr]配合物与DNA有很强的结合能力且以插入方式结合,凝胶电泳实验发现我们所设计的配合物[Cu-Phen-Tyr]与没食子酸的混合体系对诱导DNA链的断裂有很高的效率。