【摘 要】
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十字花科根肿病是由芸薹属根肿菌侵染引起的专性寄生土传病害,是十字花科作物主要病害之一。前人将QS＿B3.1基因初步定位在大白菜A3染色体2.89Mb区域内。本研究在QS＿B3.1基因初步定位的基础上,利用抗根肿病大白菜‘CR510’和感病大白菜‘59-1’构建实验群体,对其进行精细定位并找到候选基因。主要结果如下:1.抗病亲本‘CR510’和感病亲本‘59-1’杂交获得F?,F?自交收获F?,利用
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十字花科根肿病是由芸薹属根肿菌侵染引起的专性寄生土传病害,是十字花科作物主要病害之一。前人将QS＿B3.1基因初步定位在大白菜A3染色体2.89Mb区域内。本研究在QS＿B3.1基因初步定位的基础上,利用抗根肿病大白菜‘CR510’和感病大白菜‘59-1’构建实验群体,对其进行精细定位并找到候选基因。主要结果如下:1.抗病亲本‘CR510’和感病亲本‘59-1’杂交获得F?,F?自交收获F?,利用QS＿B3.1基因侧翼标记cnu-ssr316,syau-In Del3008和sau＿um026对F?3000株植株进行重组单株的筛选,共筛选出重组单株51株,51株重组单株共有12种基因型。重组单株自交收获F?群体,利用根肿菌4号生理小种(菌号LNND-2)接菌F?群体(每个家系30株)进行抗病性鉴定,最终8个家系表现完全抗病,18个家系表现完全感病,25个家系出现性状分离,分离比是3:1,符合QS＿B3.1抗病位点显性单基因遗传。2.在初步定位区域内即cnu-ssr316到sau＿um026开发加密标记,共开发19对具有多态性的引物,利用这19对引物对重组单株进行基因型鉴定。并利用F?群体(180棵植株)利用Join Map 4.0构建抗病基因QS＿B3.1的遗传图谱。利用Map Chart 2.2构建物理图谱。最终将QS＿B3.1基因定位区间缩小到大白菜A3染色体上753.4kb区域内。3.在大白菜A3染色体上QS＿B3.1基因定位区间(753.4kb)内共有109个基因,其中抗病基因有5个包括Bra019407,Bra019409,Bra019410,Bra019412和Bra019413,这5个基因在‘CR510’中扩增的长度分别为934bp,4726bp,5362bp,669bp,3028bp。将这5个候选基因进行测序,序列差异分析显示在‘CR510’中Bra019407和Bra019412基因序列与大白菜参考基因组序列完全一致,可以排除这两个候选基因;另外三个具有典型抗病基因结构域的基因Bra019409,Bra019410和Bra019413与参考基因组序列存在较大差异,在内含子和外显子部分(TIR及LRR结构域)均有大片段的插入和缺失以及大量的SNP变异。因此QS＿B3.1抗病基因的候选基因选定为Bra019409,Bra019410和Bra019413。
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