菊属植物遗传多样性的同工酶分析

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菊花(Dendranthema×grandiflorum Kitamu)为菊科菊属植物,是我国十大传统名花和世界四大切花之一,具有观赏、食用、药用等多种价值。我国是栽培菊花的起源中心和菊属种质资源的分布中心。菊属30余种在我国分布的约有18种,栽培菊花品种达3000余个。本文采用过氧化物酶同工酶(peroxidase isozyme,POD)和酯酶同工酶(esterase isozyme,EST)对菊属8个种148份材料的遗传多样性进行了分析,为菊属物种或品种间亲缘关系研究、栽培菊花的品种分类及起源等提供参考。主要结果如下:1.菊属的148份材料共获得了12个同工酶位点,以及16种POD条带和15种EST条带。2.菊花4个品种‘九月黄’、‘早意红’、‘海林黄’和‘长紫’的嫩叶、老叶、嫩茎和木质化茎在营养生长时期和生殖生长时期的同工酶变化显示:菊花的POD和EST具有组织特异性和阶段特异性,嫩叶、老叶、嫩茎和木质化茎4类器官,以嫩叶的酶带最多,其次为老叶,再次为嫩茎,木质化茎的酶带最少;营养生长阶段的POD酶带数目更多,酶带更清晰,分离更好,此阶段的EST酶带也更清晰,分离更好。POD同工酶研究以营养生长阶段的嫩叶为好,EST同工酶研究以营养生长阶段的嫩叶为好。3.栽培菊花品种间的遗传变异很丰富,平均有效等位基因数(Effective Number of Alleles Per Locus,A)、多态位点比率(Percentage of Polymorphic Loci,P)、观察杂合度(Heterozygosity,Ho)分别为1.5699、43.23%、0.5699。其中遗传多样性最高的是‘紫宫翎管’,其有效等位基因数(A)、多态位点比率(P)、观察杂合度(Ho)分别是1.8889、66.67%、0.8889;遗传多样性最低的是‘粉紫管’、‘粉管托桂’和‘X16’,三个指标分别是1.3000、25.00%、0.3000。基于品种间遗传距离的UPGMA聚类图将栽培菊花品种按花径聚类,体现了栽培菊花品种花径的遗传分化特征,托桂品种独立成组。另外,A、P、Ho三个指标完全相同的大菊品种有70.37%聚在一起,小菊品种有87.18%聚在一起。4.野菊12个不同居群(崂山野菊、杭州野菊、溧水野菊、仪征野菊、神农架野菊、黄山野菊、庐山野菊、贵州野菊、泰山野菊、成都峰峡野菊、河南野菊、南京野菊)的平均观察杂合度(Ho)为0.1667~0.7500,其中南京野菊遗传变异最大,河南野菊最小。野菊12个居群、紫花野菊、小红菊、甘菊、异色菊、菊花脑、毛华菊2个居群(天柱山毛华菊、伏牛山毛华菊)、菊花8个品种(‘杭白菊’、‘贡菊’、‘滁菊’、‘虞姬’、‘山花烂漫’、‘绿玉’、‘金龙腾飞’和‘醉化桃’)用UPGMA聚类为两组。8个种的遗传一致度变化幅度为0.4616~0.8605,平均遗传距离为0.4517,其中栽培菊花与野菊的亲缘关系最近(遗传一致度为0.8605),野菊可能是栽培菊花的一个主要起源种。5.药用菊、食用菊和观赏菊之间的遗传变异丰富,遗传多样性最高的是观赏菊,其A、P、预期杂合度(Mean Expected Hetemzygosity,He)和Shannon指数(Shannon’s Information Index,I’)分别是1.6544、91.67%、0.3721和0.5257;遗传多样性最低的是野生菊。聚类图将40个不同用途菊花品种按不同用途聚类,体现了菊花用途的遗传分化特征。聚类结果和遗传多样性指标都表明,菊花进化顺序为药用菊→食用菊→观赏菊。6.观赏菊品种‘染水金涛’、‘风珠秋意’、‘金陵之光’、‘金陵春色’具有品种特异的同工酶谱POD-3的F带,‘绿水青山’和‘木兰换装’具有EST-6的0带,食用菊品种‘宝辛唐衣锦’和‘精兴夕映’具有POD-2的E带,可以从生化水平为菊花品种鉴定和保护提供生化证据。
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