miR-381/miR-489靶向CUL4B调控Wnt/β-catenin信号通路活性在胃癌发生进展中的作用及机制研究

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目的:探讨miR-381/miR-489靶向CUL4B调控Wnt/β-catenin信号通路活性抑制胃癌细胞发生进展的机制研究。方法:采用Western blotting检测CUL4B蛋白在胃癌组织及细胞系CUL4B蛋白中的表达,实时定量PCR检测miR-381和miR-489在胃癌组织及细胞系中的表达水平,并验证其相关关系;利用一系列细胞功能学实验观察CUL4B的表达对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响,并验证CUL4B对Wnt/β-catenin通路的影响;采用体外细胞功能学实验、体内裸鼠模型观察过表达miR-381/miR-489对胃癌细胞恶性生物学行为的影响;最后采用荧光素酶报告基因、Western blotting、实时定量PCR及功能阻断等方法探讨miR-381和miR-489对CUL4B的靶向调控作用。结果:CUL4B蛋白表达与miR-381/miR-489的表达在胃癌组织和细胞中呈负相关关系;CUL4B是miR-381和miR-489的直接靶基因之一;CUL4B能通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞的增殖,迁移和侵袭;过表达miR-381/miR-489显著抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT,且miR-381/miR-489过表达能显著抑制裸鼠体内肿瘤的生长;CUL4B过表达能部分减弱miR-381/miR-489对胃癌细胞的抑制作用。结论:本研究的结果证实miR-381/miR-489能通过靶向CUL4B从而失活Wnt/β-catenin信号通路进而抑制胃癌细胞的增殖和侵袭,miR-381/miR-489-CUL4B调控轴在胃癌细胞恶性进展的过程中发挥重要作用,CUL4B可能作为胃癌治疗的潜在靶点。
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