斑马鱼突变体nbb嗅球神经终末发育研究

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斑马鱼(Danio rerio)是研究脊椎动物胚胎发育机制十分重要的模式动物,它具有产卵多、性成熟周期短、胚胎体外受精、体外发育,而且透明等优点,是迄今为止最适合饱和诱变的脊椎动物。作为功能基因组时代生命科学研究中重要的模式脊椎动物之一,其应用领域日益广泛。斑马鱼作为模式生物的使用正逐渐拓展和深入到生命体的多种系统的发育、功能和疾病的研究中,并已应用于小分子化合物的大规模新药筛选。本实验对一种由野生型斑马鱼经过N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosurea,ENU)突变而来的斑马鱼突变体nbb进行研究。对由斑马鱼突变体nbb与转基因斑马鱼Tg(GnRH:GFP)杂交获得F1代进行筛选,寻找同时表达nbb和GFP的子代(斑马鱼GnRH:GFP-nbb),以建立突变体斑马鱼(GnRH:GFP-nbb)。利用转基因斑马鱼Tg(GnRH:GFP)在终末神经处特异性表达绿色荧光蛋白的特点,借助荧光显微镜,通过冰冻切片的手段方便直观的观察斑马鱼突变体nbb的终术神经轴突生长情况,并与野生型斑马鱼的神经发育相比较,从神经生长导向水平上明确斑马鱼突变nbb与野生型的区别,揭示nbb基因对斑马鱼终末神经发育存在的影响,从而为进一步解释其年龄依赖性的视觉系统缺陷做铺垫。本文选取不同发育时期,将突变体斑马鱼与野生型斑马鱼的神经终末发育情况作了比较,结论显示nbb突变基因使突变体纯合子终末神经发育量减少和位置发生变化;伴随着时间的增加,这种减少更加明显。突变基因对突变体杂合子也存在一定影响,这有待进一步的研究证明。
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