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目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发病率高,预后差,其发生发展是一个多步骤的过程,包括遗传变异的积累,不同信号转导通路的激活,以驱动正常细胞逐渐转化为恶性细胞。近些年来,随着基因组学研究的深入,加深了HCC发生发展相关遗传基础的理解,但HCC发生和发展的确切分子机制仍然不清。本文旨在通过应用NGS技术检测HCC组织基因突变情况,对138例接受根治性切除治疗的HCC病人的测序结果进行分析,总结其基因突变特征,结合患者的复发及生存等临床信息,探究肿瘤突变负荷(tumor mutation burden)与接受根治性切除的HCC患者的肿瘤复发的关系。方法收集2017年1月至2019年3月在青岛大学附属医院行肝细胞癌根治性切除术并接受基因检测的138名患者HCC组织标本,所有标本肝细胞癌诊断均经病理证实。使用QIAamp DNA FFPE组织试剂盒和的QIAamp DNA血样Midi试剂盒,从组织标本和血液样品中提取基因组DNA,基因组DNA的测序分析均在CAP认证实验室Origi Med(中国上海)的实验室进行,利用Illumina Nova Seq 6000获得高通量测序平台获得基因组的突变情况。通过计数检查序列的每兆碱基(Mb)的细胞突变的数量,而计算得TMB评分。同时记录患者的基本信息、血清学检验结果、肿瘤病理学特征以及随访资料。定性资料采用χ2检验,定量资料采用t检验,将P<0.05的因素纳入Logistic回归分析。采用Kaplan-Meier法分析TMB对患者的复发的影响,以P<0.05认为有统计学意义。结果本组患者男性123例,女性15例,平均年龄57.0岁(31.0~78.0岁)。随访时间截止至2019年9月30日或患者死亡时,中位随访时间16.1个月(6.0~30.0个月)。本组共检出263个突变基因,合计827次变异,平均6.0次变异/例。所有标本均获得TMB结果,中位TMB为5.4 Muts/Mb(0~28.4 Muts/Mb),TMB75%分位值为8.5Muts/Mb。突变频率较高的基因依次为TP53、TERT、CTNNB1等,主要突变形式为单核苷酸位点变异;突变频率较高的信号通路依次为P53通路、Wnt通路、染色质重塑相关通路等。单因素分析显示,年龄>60岁、高血压、糖尿病、CTNNB1突变以及LRP1B突变的患者中,高肿瘤突变负荷(TMB-H)者的比例显著增高(P<0.05)。将上述因素纳入多因素分析显示,LRP1B突变为TMB-H的独立危险因素(P=0.009,OR=4.828,95%CI:1.493-15.583)。TMB-H组与TMB-L组的中位至疾病进展时间为14.6个月和18.0个月(χ2=3.909,P=0.048),且这两组的1年复发率分别为33.3%和15.9%(P=0.024)。结论本组患者的基因突变以TP53、TERT、CTNNB1为主,主要突变形式为单核苷酸位点变异,主要通路为P53通路、Wnt通路、染色质重塑相关通路,高血压、糖尿病、CTNNB1突变以及LRP1B突变对高TMB的发生有影响,LRP1B突变为高TMB的独立危险因素。TMB-H与HCC患者的根治性切除后的短期复发有关。这些发现有助于我们进一步理解HCC发生和发展的分子机制,为HCC的精准治疗提供理论依据。