抑癌基因Runx3蛋白不同免疫方法制备抗体的优劣比较

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Runx3(Runt结构域相关转录因子3)基因是近来发现的重要抑癌基因,其对细胞生长与凋亡具有关键的调控作用。研究发现其表达异常(如甲基化、基因单点突变等)与多种恶性肿瘤,尤其是胃癌有关。免疫系统是人体抵御外界病原菌侵袭的重要防御壁垒,研究发现Runx3对T淋巴细胞的发生发育也有重要作用,这更是提升了Runx3生物学功能研究的意义和重要性。随着后基因组时代即蛋白质组时代的来临,对新基因的功能及病理生理意义的解析成为生命科学领域研究的热点,因此获得其编码的蛋白质并制备特异性抗体具有十分重要的意义,这不仅仅表现在抗体在生物学研究中的意义,更多则体现在临床诊断和治疗性抗体的制备和合理使用方面.但是目前Runx3蛋白的市售抗体的效价偏低,应用普遍性不高,这大幅度限制了对Runx3的深入研究和潜在的将Runx3作为癌症早期诊断靶分子的可能性。本研究在经典的兔源、鼠源抗体制备方法的基础上,设计了四种不同的免疫方法,并对这些免疫方法的优劣进行了比较。实验过程中对新西兰大白兔和BALB/c小鼠的免疫效果、快速和传统免疫法进行了比对,结果表明小鼠相对于白兔有更大的优势,不仅抗体的效价与抗原检测免疫效果好,而且节约大量的抗原蛋白;快速和传统免疫方法相比,传统法的背景较低,但是效价不如快速免疫法,可谓各有利弊。本研究对免疫方法所做出的比较有利于Runx3蛋白抗体制备方法的改良,同时解决了Runx3蛋白市售抗体效果差的问题,而且初步比较了多种不同制备方法的利弊,对单克隆抗体工业制备的骨髓来源细胞种属具有较有价值的提示作用。
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