论文部分内容阅读
【背景】： 动脉粥样硬化是威胁人类生存的常见疾病之一，其中血管内皮细胞功能紊乱是动脉粥样硬化发生发展过程的重要生物学过程，而p53同样参与动脉粥样硬化的发生和进展。此外人类基因组中约98％为非编码RNA（ncRNA），且已被证实参与微观调控疾病的发生发展，但是在心血管疾病的发生发展中具体并不清晰。动脉粥样硬化发展过程中发生DNA损伤，有研究表明lncRNA PANDA在DNA损伤时，可通过p53依赖信号通路激活进一步抑制凋亡，促进细胞生存。基于以上背景，我们旨在研究PANDA是否参与动脉粥样硬化发展过程和其在心血管疾病中的可能作用机制，进一步了解lncRNA的作用。 【方法】： 抽取44例冠状动脉造影确诊的冠状动脉狭窄>50%冠心病患者(atherosclerosis group)，性别不限，排除高血压、糖尿病等血管相关性疾病，其中14例为急性心肌梗死患者，以及52例对照志愿组(NC group)外周血，通过逆转录聚合酶链式反应检测外周血单个核细胞中长链非编码基因PANDA和BCL-2的表达水平。在内皮细胞模型中，通过RNA干扰技术对PANDA基因进行沉默，细胞学实验分为空白对照组、转染试剂组、siRNA干扰组。通过流式细胞学和hochest33258核染色法检测细胞凋亡水平，EdU和CCK8方法检测细胞增殖水平。 【结果】： RT-qPCR结果提示所有的冠心病患者外周血单个核细胞中PANDA和BCL-2的表达高于对照组。而在冠心病组中，急性心梗患者中PANDA和BCL-2的表达明显高于非急性心梗患者。在内皮细胞模型中，通过对血管内皮细胞进行PANDA基因沉默后，PCR结果表明PANDA表达明显受到抑制，EdU实验和CCK8均发现细胞增殖水平下降，通过流式细胞术和hochest33258核染色法发现细胞凋亡水平增高。 【结论】： 在动脉粥样硬化患者中，PANDA和BCL-2表达明显升高，内皮细胞中进行siPANDA 发现细胞增殖水平受到抑制，凋亡水平升高。这说明PANDA可能通过抑制细胞凋亡、促进细胞增殖，参与动脉粥样硬化的病理过程，且或许 PANDA可作为动脉粥样硬化的标记物。针对PANDA进行靶基因治疗可能为动脉粥样硬化疾病提供全新治疗靶点。