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目的:观察咳喘宁口服液干预SIRPα对哮喘模型大鼠Th1/Th2的影响,探讨哮喘中神经系统与免疫系统的相互作用机制,进一步阐明哮喘神经源性炎症机制以及咳喘宁的调节作用机理。方法:(1)哮喘发病时SIRPα及其配体CD 47的表达及咳喘宁口服液对其表达的影响。幼龄Wistar大鼠30只,随机选取5只为正常组,其余动物按幼龄大鼠RSV复合OVA哮喘模型方法造模,于致敏2周后,通过观察大鼠精神状态及心率、呼吸来检测模型是否成功。待造模完成后,将造模成功后的动物按随机数字表法分为5组,每组5只,即哮喘大鼠组(模型组)、哮喘大鼠SIRPα抗体干预组(SIRPα抗体组)、哮喘大鼠咳喘宁低剂量治疗组(咳喘宁Ⅰ组)、哮喘大鼠咳喘宁中剂量治疗组(咳喘宁Ⅱ组)、哮喘大鼠咳喘宁高剂量治疗组(咳喘宁Ⅲ组)。除正常组外,其余5组大鼠分别给药(SIRPα抗体组予以SIRPα抗体腹腔注射,咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别给予咳喘宁低、中、高剂量灌胃),每天1次,共2周。检测各组动物脊髓后角中SIRPα及其配体CD 47分别在mRNA、蛋白质水平上的表达:mRNA水平检测用Real-time PCR技术,蛋白质水平采用Western blotting技术。(2)哮喘发病时SIRPα对Th1/Th2的免疫调节作用及咳喘宁口服液的干预作用。幼龄Wistar大鼠60只,随机选取6只为正常组,其他动物按幼龄大鼠RSV复合OVA哮喘模型方法造模,于致敏2周后,检测模型是否成功。待造模完成后,将动物按随机数字表法分为9组,每组6只。即哮喘大鼠组(模型组)、哮喘大鼠SIRPα干预组(SIRPα组)、哮喘大鼠SIRPα抗体干预组(SIRPα抗体组)、哮喘大鼠不同剂量咳喘宁干预组(咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)、哮喘大鼠SIRPα+不同剂量咳喘宁干预组(联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)。除正常组外,其余9组大鼠分组给药。哮喘大鼠不同剂量咳喘宁干预组(咳喘宁Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)、哮喘大鼠SIRPα+不同剂量咳喘宁干预组(联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),此6组均予以咳喘宁口服液灌胃治疗,按临床量效关系观察结果拟定咳喘宁口服液高剂量1ml/100g,中剂量0.3ml/100g,低剂量0.033ml/100g,每日1次,持续2周,直到处死。哮喘大鼠SIRPα干预组(SIRPα组)、哮喘大鼠SIRPα+不同剂量咳喘宁干预组(联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),该4组均给予SIRPα腹腔注射;哮喘大鼠SIRPα抗体干预组(SIRPα抗体组)给予SIRPα抗体腹腔注射。腹腔注射每日1次,共2周。检测大鼠动物模型中血清中IFN-γ、IL-4等炎症因子表达变化:采用酶联免疫吸附法(ELISA)方法。结果:1.哮喘发病时SIRPα及配体CD47的表达:(1)与正常组相比,咳喘宁Ⅱ组SIRPα及其配体CD47的表达稍增高,但差异无统计学意义(P>0.05);(2)与正常组、咳喘宁Ⅱ组相比,模型组、抗体组、咳喘宁Ⅰ组、咳喘宁Ⅲ组SIRPα及配体CD47的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与咳喘宁Ⅱ组相比,咳喘宁Ⅰ组、咳喘宁Ⅲ组SIRPα及配体CD47的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);(4)与SIRPα抗体组相比,咳喘宁Ⅰ组SIRPα在mRNA上的表达稍增高,咳喘宁Ⅱ组的SIRPα及CD47的蛋白质水平上的表达稍降低,但差异无统计学意义(P>0.05),咳喘宁Ⅲ组、模型组SIRPα及配体CD47的表达均明显增高,且差异具有明显统计学意义(P<0.01);(5)与模型组相比,正常组、SIRPα抗体组、咳喘宁Ⅰ组、咳喘宁Ⅱ组、咳喘宁Ⅲ组SIRPα及配体CD47的表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。其中咳喘宁Ⅱ组的SIRPα及CD47在蛋白质水平上的表达稍低于SIRPα抗体组,但差异无统计学意义(P>0.05)。2.哮喘发病时SIRPα对Th1/Th2的免疫调节作用(IL-4与IFN-γ的含量变化)及咳喘宁口服液的干预作用。(1)正常组、咳喘宁Ⅱ组、抗体组均稍有差异,但差异无统计学意义(P>0.05);(2)与正常组、咳喘宁Ⅱ组、抗体组对比,抗原组、联合Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组、咳喘宁Ⅰ、Ⅲ组的IL-4均明显升高,IFN-γ均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与模型组相比,联合Ⅱ组IL-4含量稍降低,IFN-γ稍升高,但差异无统计学意义(P>0.05)联合Ⅰ、Ⅲ组IL-4含量升高且IFN-γ明显降低,抗体组、咳喘宁Ⅱ组的IL-4含量明显降低且IFN-γ含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);咳喘宁Ⅰ、Ⅲ组的IL-4明显升高但IFN-γ含量稍降低,差异无统计学意义(P>0.05);(4)抗原组的IL-4含量明显高于其他各组,但IFN-γ明显低于其他各组,且差异有统计学意义(P<0.05);(5)与咳喘宁Ⅰ组相比,咳喘宁Ⅱ组IL-4含量明显降低且IFN-γ升高,且差异有统计学意义,联合Ⅰ、Ⅲ组IL-4含量升高且IFN-γ降低,差异有统计学意义(P<0.05);咳喘宁Ⅲ组IL-4含量稍降低,IFN-γ稍升高,但差异无统计学意义(P>0.05);联合Ⅱ组IL-4含量稍升高,IFN-γ稍降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)哮喘发病时SIRPα及配体CD47表达明显增高,咳喘宁口服液能抑制SIRPα及配体CD47的表达,中剂量组效果最佳。(2)哮喘发病时Th1/Th2明显失衡,咳喘宁口服液可能通过干预SIRPα来改善Th1/Th2失衡,从而改善哮喘的气道炎症。(3)咳喘宁口服液能有效改善哮喘的Th1/Th2失衡,其以中剂量治疗组效果最佳。