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目的：近年来的研究发现,一类骨髓来源的前体细胞能够进入CNS并分化为小胶质细胞,发挥着吞噬和清除AD脑内Aβ的有益作用。SDF-1是骨髓来源的干细胞/前体细胞最强大的趋化因子,能够诱导骨髓来源的干细胞/前体细胞的定向迁移。在本研究中,我们期望利用SDF-1对骨髓来源小胶质细胞的趋化作用促进其向CNS内的迁移和趋化,增加脑内具有强吞噬功能的小胶质细胞的数量,促进其对AD脑内Aβ的吞噬和清除,为探索SDF-1治疗AD的可行性提供依据。方法：将28周龄的同窝仔野生型(wild type, WT)小鼠和APP/PS1双转基因小鼠分为对照组和SDF-1α干预组,分别予以侧脑室注射PBS和SDF-1α,一周一次,连续注射八周。采用免疫荧光组织化学方法观察注射后小鼠脑内小胶质细胞的数量,Aβ斑块的数量和面积,小胶质细胞与Aβ的关系,Aβ与神经元的定位关系。采用Western blot的方法定量分析SDF-1α干预后脑内小胶质细胞标志物Iba-1表达的变化。检测注射过程中小鼠体重变化。结果：与对照组相比,长程的SDF-1α侧脑室注射能够增加WT小鼠皮层和海马小胶质细胞的数量；长程SDF-1α侧脑室注射能够减少APP/PS1小鼠皮层和海马部位Aβ的数量和面积,通过对Aβ面积与小胶质细胞数量进行定位定量分析发现,SDF-1注射可以增加Aβ斑块周围小胶质细胞的数量；同时SDF-1注射对小鼠的体重没有明显影响。结论：长程SDF-1α侧脑室注射可能减少APP/PS1小鼠脑内Aβ的沉积,该保护作用可能通过促进小胶质细胞向脑内、尤其是向Ap斑块周围的趋化作用实现；SDF-1可能成为一个治疗AD的新的干预方法。目的：构建含小鼠SDF-1 (CXCL12)基因的重组腺病毒载体,为后续利用转基因技术研究AD的治疗策略奠定基础。方法：以腺病毒Adeno-XTM表达系统为基础,以体外连接方法为基础构建表达含小鼠SDF-1基因的重组腺病毒载体。首先,由质粒pSDF-1-mCherry中酶切出SDF-1的基因片段并将其克隆到pEGFP-N1载体得到质粒pSDF-1-EGFP。而后将p SDF-1-EGFP和pShuttle2均经NheⅠ和NotⅠ双酶切,用连接酶连接成pShuttle2-SDF-1-EGFP,酶切并测序鉴定。将pShuttle2-SDF-1-EGFP用Ⅰ-CeuⅠ和PI-Sce I双酶切后,回收含SDF-1和EGFP基因的2.1kb酶切片段,与腺病毒骨架质粒pAdeno-X(已用Ⅰ-CeuⅠ和PI-SceⅠ切开)连接,得到pAdeno-SDF-1-EGFP。酶切鉴定后,用PacⅠ酶将重组腺病毒质粒pAdeno-SDF-1-EGFP线性化,然后通过脂质体转染线性化的pAdeno-SDF-1-EGFP于HEK293细胞以包装制备重组腺病毒。重组腺病毒Ad-SDF-1-EGFP经PCR鉴定之后反复感染HEK293细胞进一步扩增并纯化。结果：重组穿梭载体质粒pShuttle2-SDF-1-EGFP酶切后得到特异的酶切产物且测序一致,重组成功。腺病毒载体质粒pAdeno-SDF-1-EGFP酶切后得到特异酶切产物,重组成功。重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞48h后开始观察到EGFP的表达,扩增第4-5天可见到细胞病变效应(cytopathic effect, CPE),重组腺病毒Ad-SDF-1-EGFP的DNA进行PCR得到225bp的SDF-1基因的PCR产物。结论：成功构建了表达小鼠SDF-1的重组腺病毒载体Ad-SDF-1-EGFP,为探索相关转基因技术治疗AD,以及进行SDF-1的体内特性研究提供实验基础。