丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是肝炎、肝硬化甚至肝癌等肝脏疾病的主要致病因素之一。HCV患者多、传播广、变异快等特点为其治疗带来了难度。目前HCV主要治疗手段是通过直接抗病毒药物DAA,而靶向HCV宿主因子是另一种抗HCV的策略,人类尚没有研制出针对HCV的有效疫苗。HCV生命周期的主要步骤包括病毒进入宿主细胞,病毒基因组的脱壳,病毒蛋白的翻译,病毒基因组的复制以及病毒微粒的组装和释放。其中病毒进入细胞的过程由多种共受体介导,如CLDN1、CD81、SR-BI及Occludin等。在本论文中,我们确定了 CLDN12和UGGT1可以作为宿主因子在HCV进入过程中发挥重要作用。实验表明,敲降CLDN12可以抑制HCV进入细胞,而过表达CLDN12可以促进HCV进入细胞。因此我们猜测CLDN12是HCV的一个共受体。同时我们发现,CLDN12同另一个HCV共受体CLDN1一样,可以与共受体CD81结合,这从另一方面支持了我们的假设。此外,CLDN12与claudins家族蛋白CLDN1、CLDN6、CLDN9一样,可以和COPⅡ运输途径中关键的货物分选蛋白Sec24C相互作用,敲降Sec24C或抑制COPⅡ均可降低CLDN12在细胞质膜的分布,因此我们得出结论:CLDN12依靠COPⅡ通路被运送到细胞表面。我们还发现CLDN12存在N糖基化,且其N糖基化对于CLDN12的细胞表面定位和HCV进入细胞过程都是必需的。我们从与HCV受体SR-BI相互作用的蛋白入手,通过免疫沉淀结合质谱分析,发现UGGTI与SR-BI存在相互作用。进一步研究表明,人SR-BI蛋白存在N糖基化,且预测的SR-BI蛋白的9个天冬酰胺位点均可被N-糖基化。敲降UGGT1蛋白可以降低SR-BI蛋白水平,利用HCV的真病毒和假病毒研究模型,我们发现敲降UGGT1后,HCV进入细胞的量低于未敲降UGGT1的对照组。因此我们认为UGGT1是影响HCV进入的宿主因子,UGGT1通过影响SR-BI而影响HCV的进入。同时还发现了 SR-BI影响UGGT1介导细胞内蛋白折叠过程的功能,部分解释了 SR-BI影响N糖基化的的机理。宿主肝脏细胞的蛋白参与HCV生命活动的多个阶段,我们从影响病毒进入细胞过程着手,探究宿主蛋白CLDN12和UGGT1对HCV病毒的作用,能够为研制出特异性药物提供理论支持和治疗思路。