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目的:观察湖北枫杨不同部位提取物对人类风湿关节炎成纤维滑膜细胞MH7A增殖和凋亡的影响,初步探讨其诱导MH7A细胞凋亡的可能机制。方法:制备湖北枫杨不同部位(乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇)提取物;用不同浓度的湖北枫杨各部位提取物分别作用于体外培养的MH7A细胞,用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的情况;取其中增殖抑制作用最好的活性部位提取物作用于体外培养的MH7A细胞,用Annexin V-FITC/PI双染色法检测MH7A细胞凋亡的情况;用比色法检测MH7A细胞Caspase-3、Caspase-9的酶活性;用Western blotting法检测MH7A细胞Cyt-C、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bcl-2、Bax的表达;用实时荧光定量PCR法检测MH7A细胞P53、Bax、Bak、Bcl-2、Bcl-x L的mRNA表达。结果:与阴性对照组相比,各浓度的湖北枫杨石油醚提取物、正丁醇提取物在6h、12h、24h对MH7A细胞增殖均无明显的抑制作用;湖北枫杨氯仿提取物从500μg/ml起在6h、12h、24h对MH7A细胞增殖有抑制作用(P<0.01);湖北枫杨乙酸乙酯提取物从1mg/ml起在6h、12h、24h对MH7A细胞增殖有抑制作用(P<0.05或P<0.01);除3.125μg/ml、6.25μg/ml、12.5μg/ml浓度的湖北枫杨乙醇提取物在6h时对MH7A细胞无明显抑制作用外,各浓度的湖北枫杨乙醇提取物在6h、12h、24h对MH7A细胞增殖均有抑制作用(P<0.01),随时间延长而增加,但无剂量依赖关系;与阴性对照组相比,24h时浓度为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的湖北枫杨乙醇提取物均可诱导MH7A细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量依赖关系(P<0.05);用浓度为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的湖北枫杨乙醇提取物作用MH7A细胞24h后,细胞内Caspase-3、Caspase-9的酶活性升高;Cyt-C、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax的蛋白表达均升高,Bcl-2的蛋白表达下降;P53、Bax、Bak的mRNA表达升高,Bcl-2、Bcl-x L的mRNA表达降低。结论:与石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇部位的提取物相比,湖北枫杨乙醇提取物可明显抑制MH7A细胞增殖,诱导MH7A细胞凋亡,并调控Cyt-C、P53、Caspase家族、Bcl-2家族相关蛋白的表达。因此推测该提取物可能通过影响线粒体凋亡途径诱导人类风湿关节炎成纤维滑膜细胞MH7A的凋亡,抑制其增殖。