刺五加总黄酮的纯化工艺和指纹图谱研究

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刺五加为五加科植物,是我国北方地区特产常用药材之一。其根、根茎(五加参)叶、花及果实均可入药,味辛、微苦、性微温。归脾、肾、心经。是一味强壮固本的药物。刺五加植株的各部位均含有黄酮类化合物,其叶中含量为最高。刺五加叶含有的总黄酮具有广泛的生物活性。为了更好地开发利用刺五加这一中药资源,本文实验主要研究了刺五加叶总黄酮的纯化工艺、刺五加各部位提取物的超高液相测量方法的建立、分析以及刺五加提取物有效成分含量的测定。论文主要做了以下工作:用大孔树脂法对刺五加叶提取物中的总黄酮进行富集,优化的最佳工艺条件为:使用DM130型大孔树脂,洗脱剂为体积分数40%的乙醇水溶液,水洗脱用量为4倍-5倍的树脂柱体积,水洗脱用量为4倍-5倍的树脂柱体积,醇洗脱速度为12-16ml/min,将洗脱液减压浓缩,冷冻干燥后即得刺五加叶总黄酮。其总黄酮的含量达到60%以上,适宜于工业生产,有广阔的应用前景。建立了利用超高效色谱仪对刺五加植株不同药用部位紫丁香苷含量的测量方法,经实验,选用Agilent Zorbax C18 (4.6mm×150 mm 5μm)色谱柱,柱温:30℃,流动相选用乙腈、水,其比例为10:90,洗脱流速为0.8 ml/min,检测波长为265nm.将样品注入仪器后,记录30 min色谱图。结果表明,刺五加植株不同药用部位的紫丁香苷的含量随着生长月份的不同而产生变化,根中紫丁香苷含量随月份增加而增加,枝中紫丁香苷含量随月份增加而减少。由于刺五加可入药部分较多且药效较好,现在已经开始人工栽培的尝试。利用紫外分光光度法对不同的两种栽培方式、不同采收期的刺五加的不同药用部位进行了黄酮类化合物含量的测量。由结果可看出,采用一定的遮阳栽培对于刺五加各部位黄酮类化合物含量有着一定的影响,其检测数值普遍高于未有人工处理的植株。可为以后刺五加作为药用时栽培、采收提供一定的参考。
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