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研究背景:P62(也称sequestosome-1或SQSTM1)可通过多种途径参与自噬的调控。它可与自噬体膜蛋白LC3-II相结合,促使泛素化蛋白聚集体被自噬体吞噬,与组蛋白去乙酰化酶HDAC6相作用抑制其去乙酰化酶活性,从而维持乙酰化α-微管蛋白的水平及微管蛋白的稳定性,调控自噬体转运过程。此前研究对人前列腺癌(Prostate Cancer,PCa)及良性前列腺增生患者(Benign Prostatic Hyperplasia,BPH)组织进行免疫组化实验,发现前列腺癌患者的P62水平显著高于前列腺增生患者,且高水平的P62与肿瘤的分级及转移密切相关。在此基础上,本研究拟进一步探明P62对前列腺癌增殖、侵袭、转移及自噬的影响,并探讨其中可能的作用机制。研究方法:本研究通过慢病毒载体技术构建了P62过表达DU145细胞株,并利用CRISPR/Cas9技术构建P62敲除DU145细胞株,进行CCK8及结晶紫染色等细胞增殖实验、细胞迁移实验、细胞侵袭实验;以及Western blot免疫印迹分析和共聚焦荧光显微镜的应用来阐明P62水平的改变对PCa细胞增殖、迁移、侵袭、上皮-间质转化态形成、自噬通量及微管蛋白乙酰化水平的影响。结果:P62可通过维持HDAC6活性抑制乙酰化-α-微管蛋白的表达及保持微管稳定性,从而阻碍自噬体降解并促进PCa细胞上皮-间质转化态的形成;并显著增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结论:P62通过维持HDAC6表达水平抑制自噬及促进上皮-间质转化形成从而促进前列腺癌的恶性进展。