【摘 要】
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通过有机相合成制备了尺寸在4nm左右的具有超顺磁性的磁性纳米粒子,采用原子转移自由基聚合的方法,在磁性纳米粒子表面原位引发制备了具有温度响应性链段的聚-2-甲基-2-丙烯酸-
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通过有机相合成制备了尺寸在4nm左右的具有超顺磁性的磁性纳米粒子,采用原子转移自由基聚合的方法,在磁性纳米粒子表面原位引发制备了具有温度响应性链段的聚-2-甲基-2-丙烯酸-2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯(PMEO2MA)以及具有基因递送功能的聚甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯(PDMAEMA)修饰的温度/磁性双响应载体。通过高分辨透射电镜(HRTEM)、磁性能分析、热失重分析(TGA)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)以及聚合物溶液低临界温度的测定(LCST)等方法对载体进行了表征,证实了双响应性阳离子聚合物载体的成功制备。琼脂糖凝胶电泳、透射电镜以及Zeta电位分析仪等方法考察了载体/pDNA所形成的复合物的性能。琼脂糖凝胶电泳实验表明,阳离子链段的长短将直接影响聚合物载体对DNA的压缩及保护能力。通过透射电镜和粒径分析证实了载体/pDNA所形成的复合物成球状,且复合物粒径小于200nm,为转染的有效粒径。采用荧光素酶报告基因和绿色荧光蛋白报告基因考察了载体介导的COS-7细胞和HepG-2细胞的转染效率。实验结果表明,在温度和磁场双重刺激下,载体的转染效率明显提高,达到或远超过正对照PEI25k的转染效率。MTT细胞毒性表明,该载体不仅具有较高的转染效率,同时具有较低的细胞毒性。磁场和温度的联合作用有望成为提高非病毒载体转染效率的简便易行的方法。
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