去氢骆驼蓬碱对甲状腺癌的潜在抗肿瘤体内外效应

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背景:甲状腺癌是在内分泌系统中最常见的一种类型,主要包括四个主要类型,分化型甲状腺癌包括甲状腺乳头状癌和滤泡癌,均来源于滤泡上皮,占90%以上,其中甲状腺乳头状细胞癌(PTC)是最常见的一种。尽管包括PTC在内的分化型甲状腺癌恶性度较低并且高度可愈,但是此类肿瘤在初次治疗后的复发率很高。甲状腺癌对常规化疗药物不敏感,且后者副作用大。因此,研制新型抗癌药物就显得尤为重要。最近越来越多的证据证明了有前景的抗肿瘤中药,其中去氢骆驼蓬碱(harmine,HM)近年来被视为一个颇有前途的癌症治疗候选药物,但是,去氢骆驼蓬碱对甲状腺癌的生物学效应和作用机制仍不清楚。本研究通过基础实验模型初步观察去氢骆驼蓬碱对人甲状腺癌的体内、外抗肿瘤效果,并初步探讨其可能的抗癌机制。目的:本研究初步观察盐酸去氢骆驼蓬碱对人类甲状腺癌细胞的体内、外抗肿瘤效果,并探讨可能的抗癌机制。方法:通过XTT法来检测细胞凋亡,DAPI染色法来观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪进一步检测细胞凋亡率;通过DNA片段化检测及HM作用于TPC-1细胞克隆形成;通过Western blot免疫印迹法及Elisa法来检测凋亡相关蛋白;通过划痕损伤愈合和transwell室侵袭试验来评价HM对甲状腺癌细胞迁移和侵袭能力。HM作用于裸鼠体内移植瘤来观察体内抗肿瘤效应。结果:盐酸去氢骆驼蓬碱作用于人甲状腺乳头状细胞后,不同浓度的药物对其均有抑制作用,且呈现一个剂量-效应的正相关关系(P<0.01),24、36及48小时IC50值分别为16.57±1.4、9.48±1.1及5.51±0.7(ug/ml);不同浓度的药物作用后,均有明显的晚期凋亡细胞群,同样呈现一个剂量-效应的正相关关系(P<0.01);与对照组相比,其甲状腺乳头状癌细胞克隆随着盐酸去氢骆驼蓬碱的增加反而减少;盐酸去氢骆驼蓬碱作用后,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量逐渐降低,而凋亡蛋白Bax逐渐升高;不同浓度的药物作用于人甲状腺乳头状细胞后,细胞划痕试验显示细胞的迁移能力较对照组降低;transwell室侵袭试验显示细胞的粘附、侵袭能力的下降,同样的呈现一个剂量-效应的正相关关系(P<0.01)。盐酸去氢骆驼蓬碱作用于裸鼠体内移植瘤试验示:盐酸去氢骆驼蓬碱有明显的延迟肿瘤生长作用。结论:盐酸去氢骆驼蓬碱通过诱导细胞的凋亡来抑制人甲状腺乳头状细胞的生长;可以抑制甲状腺癌细胞迁移和侵袭能力。
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