核因子κB(nuclear-factor-κB，NF-κB)是一种重要的转录因子，广泛存在于真核细胞中，参与多种基因的表达调控，影响细胞的生长、分化、凋亡、癌变和个体发育等多种生物学功能。近年来研究表明，NF-κB还存在于脑血管内皮细胞、神经细胞及胶质细胞中，与脑缺血及再灌注损伤的炎症机制密切相关，已成为研究热点。 一般情况下，NF-κB与抑制蛋白IκB(Inhibitor κB)形成复合体，以无活性形式存在于胞浆中。当细胞受刺激后，NF-κB活化，进入细胞核与相应靶基因结合，可表达各种粘附分子、白细胞介素、一氧化氮合酶等，导致缺血再灌注损伤。 我们采用体外培养的胎鼠原代神经细胞，参照Mitani等建立的神经元类缺血方法，对其类缺血后再复氧并进行免疫荧光染色、流式细胞仪检测。观察核因子NF-κB在神经元中的表达及其分布情况，证实其被激活后由胞质转入胞核的过程。并用氟桂利嗪进行干预治疗，探讨氟桂利嗪在脑缺血再灌注损伤时对NF-κB表达的影响，试图更进一步解释氟桂利嗪在脑缺血再灌注损伤中的保护作用。 实验一结果如下： 第四军医大学硕士学位论文一 门）免疫荧光抗体染色表明：NF1 B p65存在于胎鼠原代神经细胞中，未被激活时仅存在于胞浆中，基础表达量很低，以轴丘部表达稍高。经缺血再灌注后，NF。B p65转位至细胞核内，在胞核内表达明显增高，胞浆仍有表达，主要见于轴丘部。 （2）流式细胞仪计数检测表明：体外培养的原代神经细胞未缺氧时NF－K B表达很低。缺血再灌注后，再灌15分钟其表达明显增高（Pwto刀1）；再灌30分钟达高峰，表达升高40倍（P＜0刀1）。随后表达下降，于360分钟降至较低水平（P＜0刀1）。 实验二结果如下： 流式细胞仪检测结果显示：经氟桂利嗓干预治疗，原代神经细胞中NF－K B的活性降低（P＜0．of）。 本次实验结论如下： 门）NF4 B p65存在于原代细胞中。 Q）NF4 B p65基础表达很低，主要分布于轴丘及胞核周围。 臼）缺血再灌后，NF4 B p65胞浆表达明显升高，并转位至核。 N）NF＊ B P65表达迅速，表达量高。缺血再灌注后 15分钟即进 入胞核，30分钟表达己达高峰，360分钟后降至较低水平。 6）以上结果均说明缺血再灌注过程中，NF－K B被激活，并转入 核内发挥其信号转导和基因转录调节作用。 “）氟桂利唤能显著抑制 NF1 B p65的活性。