论文部分内容阅读
苹果树腐烂病是中国苹果产业的重大威胁,有苹果树的“癌症”之称。目前防治该病害主要依靠杀菌剂,而杀菌剂存在持效期较短,难以渗透到树皮组织内部,处理后复发率较高,且对树体和环境存在农药残留等副作用。探索高效的生物防治技术在控制苹果树腐烂病中变得越来越重要。利用生防细菌对腐烂病开展生物防治具有广阔的应用潜力。本研究室前期研究发现8株生防细菌对镰刀菌属有很好的抑制作用,但这些菌株对腐烂病菌的拮抗作用及生防效果尚不清楚。本研究首先对8株生防菌进行了生防效果研究,分别通过室内试验及离体枝条试验测试了8个菌株对腐烂病菌的拮抗作用,然后采用种子萌发试验和田间试验分别测试了8个菌株的促生效果。根据上述试验结果,将拮抗菌和促生菌两两组合形成菌株组合,通过离体枝条和田间试验进一步测试了菌株组合对腐烂病的生防效果。将效果较好的2个菌株BV2007和Y5加工成膏剂,通过活体试验明确了2株生防菌膏剂对腐烂病的防控效果。本研究为进一步开发新型苹果树腐烂病生防制剂提供了依据。主要研究结果如下:
1.通过平板对峙法、生长速率法和孢子萌发法等三种方法在室内分别测试了8株生防细菌对苹果树腐烂病菌的拮抗效果,结果表明这8个生防菌株对腐烂病菌菌丝生长和分生孢子萌发均有显著的拮抗作用。其中在平板对峙法测试中X-1、Y5和BV2007的发酵液抑制作用达到55%以上,并且都导致腐烂病菌菌丝生长受阻,畸形。在生长速率法试验中,X-1、Y5和BV2007的无菌滤液抑制作用达到85%以上;在孢子萌发法试验中,X-1、Y5和BV2007的无菌滤液对分生孢子萌发的抑制作用达到78%以上。
2.在离体苹果枝条上测试了8株生防细菌对苹果树腐烂病保护与治疗的防治效果。菌株X-1、BV2007、Y5和X-2的发酵液保护作用显著,防治效果均超过70%;菌株X-1、BV2007和X-2的无菌滤液保护防治效果分别为73.26%、54.74%和43.61%。菌株BV2007的发酵液治疗效果显著,但防效仅为45.26%;菌株Y5的无菌滤液治疗防效显著,达到60.17%。
3.通过海棠种子萌发试验和促进伤口愈合试验测试了8株生防细菌的促生效果。海棠种子通过菌株X-2、BV2007和X-3的发酵液处理5d后,种子萌发率分别达到72.22%、68.89%和65.56%。苹果枝条的伤口经菌株X-2、ND-7、BV2007和X-3的发酵液处理3个月后,促愈效果明显提高,分别达到了32.86%、31.83%、25.65%和25.14%。对促生菌X-2、X-3、BV2007和ND-7与拮抗菌X-1、BV2007和Y5的相容性进行了测试,结果表明,供试试验菌株组合都具有相容性。
4.通过离体枝条和田间试验测定了生防菌株组合对苹果树腐烂病的保护与治疗作用防治效果。在离体枝条试验中测试了11种生防细菌菌株组合,其中Y5+X-3、Y5+BV2007、BV2007+X-2、X-1+ND-7、X-1+BV2007和X-1+X-2等6个菌株组合的发酵液的保护防效分别达到58.84%、53.36%、51.93%、49.94%、44.79%和42.30%;在治疗试验中组合菌的发酵液Y5+ND-7、Y5+BV2007、BV2007+ND-7、BV2007+X-2等4个菌株组合的防效分别达到52.32%、44.78%、43.53%和41.75%。在田间试验中,菌株组合BV2007+ND-7的发酵液保护作用防效最好,达到了58.56%;菌株组合BV2007+ND-7和Y5+BV2007发酵液的治疗作用防效效果最好,分别达到63.83%和51.83%。
5.将细菌菌株BV2007和Y5分别加工成微生物膏剂,通过田间试验测试了2个微生物膏剂对苹果树腐烂病的防治效果,结果表明,微生物膏剂BV2007和Y5的保护防效分别为84.10%和79.25%,治疗防效分别达到68.06%和63.71%。
6.通过16s rDNA与gyrB序列的相似性、形态学和生理生化特征鉴定,菌株X-2、X-3、X-4和40-6被鉴定为贝莱斯芽胞杆菌,X-1、Y5、BV2007和ND-7被鉴定为解淀粉芽胞杆菌。
1.通过平板对峙法、生长速率法和孢子萌发法等三种方法在室内分别测试了8株生防细菌对苹果树腐烂病菌的拮抗效果,结果表明这8个生防菌株对腐烂病菌菌丝生长和分生孢子萌发均有显著的拮抗作用。其中在平板对峙法测试中X-1、Y5和BV2007的发酵液抑制作用达到55%以上,并且都导致腐烂病菌菌丝生长受阻,畸形。在生长速率法试验中,X-1、Y5和BV2007的无菌滤液抑制作用达到85%以上;在孢子萌发法试验中,X-1、Y5和BV2007的无菌滤液对分生孢子萌发的抑制作用达到78%以上。
2.在离体苹果枝条上测试了8株生防细菌对苹果树腐烂病保护与治疗的防治效果。菌株X-1、BV2007、Y5和X-2的发酵液保护作用显著,防治效果均超过70%;菌株X-1、BV2007和X-2的无菌滤液保护防治效果分别为73.26%、54.74%和43.61%。菌株BV2007的发酵液治疗效果显著,但防效仅为45.26%;菌株Y5的无菌滤液治疗防效显著,达到60.17%。
3.通过海棠种子萌发试验和促进伤口愈合试验测试了8株生防细菌的促生效果。海棠种子通过菌株X-2、BV2007和X-3的发酵液处理5d后,种子萌发率分别达到72.22%、68.89%和65.56%。苹果枝条的伤口经菌株X-2、ND-7、BV2007和X-3的发酵液处理3个月后,促愈效果明显提高,分别达到了32.86%、31.83%、25.65%和25.14%。对促生菌X-2、X-3、BV2007和ND-7与拮抗菌X-1、BV2007和Y5的相容性进行了测试,结果表明,供试试验菌株组合都具有相容性。
4.通过离体枝条和田间试验测定了生防菌株组合对苹果树腐烂病的保护与治疗作用防治效果。在离体枝条试验中测试了11种生防细菌菌株组合,其中Y5+X-3、Y5+BV2007、BV2007+X-2、X-1+ND-7、X-1+BV2007和X-1+X-2等6个菌株组合的发酵液的保护防效分别达到58.84%、53.36%、51.93%、49.94%、44.79%和42.30%;在治疗试验中组合菌的发酵液Y5+ND-7、Y5+BV2007、BV2007+ND-7、BV2007+X-2等4个菌株组合的防效分别达到52.32%、44.78%、43.53%和41.75%。在田间试验中,菌株组合BV2007+ND-7的发酵液保护作用防效最好,达到了58.56%;菌株组合BV2007+ND-7和Y5+BV2007发酵液的治疗作用防效效果最好,分别达到63.83%和51.83%。
5.将细菌菌株BV2007和Y5分别加工成微生物膏剂,通过田间试验测试了2个微生物膏剂对苹果树腐烂病的防治效果,结果表明,微生物膏剂BV2007和Y5的保护防效分别为84.10%和79.25%,治疗防效分别达到68.06%和63.71%。
6.通过16s rDNA与gyrB序列的相似性、形态学和生理生化特征鉴定,菌株X-2、X-3、X-4和40-6被鉴定为贝莱斯芽胞杆菌,X-1、Y5、BV2007和ND-7被鉴定为解淀粉芽胞杆菌。